BAKTERIOLOGISK SLØYFE: EGENSKAPER, TYPER, BRUK - BIOLOGI - 2026

Den bakteriologiske sløyfen er et arbeidsinstrument brukt av mikrobiologer for såing av mikrobielle kulturer (bakterier eller sopp). Det er kanskje det instrumentet som brukes mest av disse fagfolkene.

Bruken virker enkel, men den krever faktisk mye trening. Før du begynner å så, må løkken steriliseres i Bunsen-brenneren, deretter tas det mikrobielle inokulatet som kan komme fra en flytende kultur eller en solid kultur.

Typer bakteriologiske løkker. Kilde: Ingen maskinlesbar forfatter gitt. ば や お antatt (basert på krav om opphavsrett).

Når inokulatet er tatt, kan det avsettes i et flytende medium eller sås i et fast medium. Etter hver prosedyre steriliseres løkken igjen. Håndtaket er også egnet til å lage mikrobiell utstryking på et lysbilde.

Den bakteriologiske sløyfen har mange navn, inkludert: platinaløkke eller -sløyfe, inokulasjonssløyfe eller frøsløyfe, men det egentlige navnet er Kohle-loop.

Materialet som håndtaket er laget med er vanligvis en nikkel-krom (nichrom) legering eller platina. En annen variant som er tilgjengelig i markedet er plastbiologiske sløyfer til engangsbruk.

På den annen side er det flere typer bakteriologiske løkker, hver og en oppfyller en funksjon innenfor oppgavene som er utført av en mikrobiolog. Valg av håndtak vil avhenge av hva som må gjøres.

For å utføre et striatum ved uttømming for å isolere en mikroorganisme, brukes for eksempel platinusløyfen, som ender i en lukket ring, uavhengig av om den er kalibrert eller ikke.

Selv om det er å så en urinprøve, hvor det er viktig å kvantifisere CFU-er, er det nødvendig å bruke den kalibrerte sløyfen. For å inokulere biokjemiske tester, som må sås ved punktering, er nåleslyngen også viktig. Det er viktig at håndtaket håndteres av trent personell.

kjennetegn

Bakteriologiske løkker består av to ytterpunkter. Den ene enden tilsvarer håndtaket eller sokkelen, mens den andre er selve håndtaket.

Håndtak sokkel eller håndtak

Basen tjener til å gripe håndtaket under håndtering. Det er vanligvis metallisk, men har en varmeisolator for å forhindre at operatøren brennes når spissen på håndtaket steriliseres på lighteren. Den måler omtrent 20 cm, selv om den kan være lengre. Den har en tråd for å justere håndtaket.

Håndtak

Det er den funksjonelle enden, det vil si at den er den delen som kommer i kontakt med mikroorganismer og med kulturmediene. Den består av en fin ledning som settes inn i basen.

Håndtaket kan være laget av nikrom eller platina, og det kalles det noen ganger et platinahåndtak. Den er omtrent 6,5 cm lang og har en måler på omtrent 0,20 mm. Håndtaket med håndtaket kan måle 26,5 cm. Målingene kan variere fra produsent til produsent.

typer

Det er flere typer bakteriologiske løkker, og hver og en har en spesifikk bruk. Håndtakstypene er som følger: kalibrert ringformet håndtak, ukalibrert ringformet håndtak, rett eller nålhåndtak, spatulasjonshåndtak, “L” -formet håndtak og skarptippet håndtak.

På den annen side kan håndtakene være permanente eller engangsbruk. De til permanent bruk er sterilisert i lettere, er gjenbrukbare og veldig holdbare. Mens engangsartikler er sterile fra fabrikken, brukes de bare én gang og kastes.

applikasjoner

Ringhåndtak, ikke kalibrert

Det er det mest brukte håndtaket i mikrobiologilaboratoriet. Det brukes til å ta et inokulum av en mikrobiell suspensjon (flytende medium) eller en del av kolonien (fast medium), for å bli sådd i et annet kulturmedium, enten en biokjemisk test eller et mer beriket eller selektivt medium, som tilfellet kan være. Det er også nyttig for å lage mikrobiell utstryk på et lysbilde.

Med denne typen sløyfe kan det initielle inokulatet strepes. Den er også designet slik at den glir jevnt på agar, uten å skade den. Selvfølgelig krever dette et trent personale til å håndtere såteknikken, bruke riktig kraft og bevegelser for å gjøre en god striasjon.

Ulike såteknikker kan utføres med dette håndtaket. Eksempelvis blir faste medier i petriskåler vanligvis frø av utmattelse (det er flere teknikker, se video 1).

Denne teknikken er ment å oppnå isolerte kolonier for å studere og identifisere dem, spesielt når prøven er polymikrobiell, det vil si at kulturen ikke er ren (den inneholder mer enn en type mikroorganisme).

I stedet blir kilene plantet i en enkel sikksakk for å oppnå bakteriemasse, noe som ikke er nødvendig i dette tilfellet for å isolere kolonier.

Noen ganger blir de også brukt til å ta visse prøver. For eksempel brukte Rojas og kolleger den bakteriologiske sløyfen for å samle skrapeprøver fra vaginalvev hos rotter.

Bakteriologisk sløyfe med ringspiss, ikke kalibrert. Kilde: Pixinio.com

Ringformet håndtak, kalibrert

Dette håndtaket som navnet tilsier er kalibrert for å ta en spesifikk mengde mikrobiell suspensjon. Det brukes når det er nødvendig for inokulatet å overholde det som er standardisert innen teknikken.

For eksempel er det veldig vanlig å plante urinkulturer. I dette tilfellet kan en 0,01 ml og en 0,001 ml kalibrert sløyfe brukes.

Det skal bemerkes at kalibrerte håndtak har en feilmargin, som varierer i henhold til vinkelen prøven tas med og størrelsen på munnen på beholderen.

Hvis 0,001 ml sløyfen settes loddrett inn i en beholder med en liten munn (≤ 7 mm), vil mengden som tas, være 50% mindre enn ønsket.

Dette skjer fordi jo mindre diameteren på munnen på beholderen er, jo høyere blir overflatespenningen, og derfor øker vedheftskreftene mellom (glass - væske). Dette fører til at væskeladningen som tas av håndtaket blir mindre.

Hvis det tas i en vinkel på 45 ° i en beholder med bred munn (≥ 22 mm), kan 150% mer enn den nødvendige mengden samles. I dette tilfellet er overflatespenningen lavere og samholdskreftene glass / plast reduseres, mens væske-væske-samholdskraften øker.

På grunn av det ovennevnte er andre metoder for kvantifisering av kolonidannende enheter noen ganger foretrukket for urinkulturer.

Rett eller nålhåndtak

Det kalles også et trådhåndtak. Det brukes til å inokulere visse biokjemiske tester, spesielt de som må podes ved hjelp av punkteringsteknikken. Eksempel, halvfaste medier som er fremstilt i form av en blokk, for eksempel: SIM, MIO og O / F medium.

I tilfelle av MIO og SIM som vurderer bevegelighet, er det viktig at punkteringen utføres med en nåleløyfe, siden tolkningen av en positiv bevegelighet oppstår når bakteriene vokser mot sidene av det første inokulatet.

En test som er inokulert med en sløyfesløyfe, kan forfalske resultatene (falske positive). Av denne grunn, i denne typen såing, må man passe på at punkteringen er unik, og at når den fjernes, den kommer ut i samme retning som den gikk inn.

En annen test som må nåles, selv om den er tilberedt i en kileform, er Kligler. I denne testen anbefales det ikke at oksygen trenger dypt inn i agaren, da det er nødvendig med et oksygenfattig medium for at visse kjemiske reaksjoner skal kunne oppstå. Dette håndtaket brukes også til å berøre en spesifikk koloni i form av subkultur.

Spatulere håndtaket

De fleste mikroorganismer gir myke, lett å kaste kolonier. Imidlertid er det noen mikrobielle midler hvis kolonier er harde og tørre, for eksempel mykobakterier generelt og noen sopp. I disse tilfellene er det nyttig å bruke spatulasjonshåndtaket.

"L" formet håndtak

Den hyppigste bruken er å kime soppkulturer, spesielt mugg.

Skarpt spisshåndtak

Det er nyttig for å ta veldig små kolonier til stede i polymikrobielle kulturer for å kunne subkulturere dem.

Såteknikker

Video 1

Sterilisering av platinahåndtaket

Håndtaket må steriliseres før og etter bruk. For å sterilisere den bakteriologiske sløyfen i lighteren, fortsett som følger: håndtaket skal plasseres i den øvre delen av flammen, ved å innta en stilling så vertikal som mulig, på en slik måte at den steriliseres fra tuppen og oppover.

Når det fine glødetråden blir knallrødt, kan det sies å være sterilt. For å bruke den blir den avkjølt og valgt prøve tatt. (Se video 2).

Sterilisering av den bakteriologiske sløyfen

Video 2

referanser

1. "Bakteriologisk sløyfe" Wikipedia, The Free Encyclopedia. 23 jul 2019, 13:31 UTC. 18. aug 2019, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Kalibrerte metallhåndtak for mikrobiologer: Et alternativ til nasjonal produksjon. Soc. Kom. Microbiol. 2010; 30 (1): 37-42. Tilgjengelig på: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 utg. Redaksjonell Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. utg. Redaksjonell Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, et al. Bestemmelse av den smertestillende effekten av heksanekstrakt fra Eupatorium arsenei-blomster i en akutt smertemodell hos rotter. mex. vitenskap. gård. 2015; 46 (1): 64-69. Tilgjengelig på: scielo.org