BAKTERIEKULTUR: TYPER, EGENSKAPER, METODER, KRAV - BIOLOGI - 2026

En bakteriekultur er resultatet av podingen av disse mikroorganismer på næringsmedier, for at de skal reprodusere seg, noe som resulterer i utseendet av bakteriekolonier i faste medier og tåkelighet i flytende medier.

Såningsmetoden er veldig viktig for å kunne fordele inokulatet på en slik måte at bakteriene som er til stede spres og kan utvikle riktig isolerte kolonier.

Ulike avlinger plantet av forfatteren i Bacteriology Laboratory of the Biomedical and Technological Sciences Building, University of Carabobo. Kilde: sammensetning av bilder tatt av forfatteren MSc. Marielsa Gil.

Koloniene oppnådd i det faste dyrkningsmedium er konsekvensen av spredningen av mikroorganismen som ble sådd. Hver koloni starter fra en enkelt bakterie, som kan formere seg eksponentielt for å danne en makroskopisk synlig populasjon.

Det samme forekommer i flytende kulturmedier, men i dette tilfellet observeres bakterievekst av turbiditet.

Bakteriell vekst er mulig når det valgte kulturmediet oppfyller de ernæringsmessige og pH-betingelsene som er nødvendige for utvikling av en bestemt bakterie. I tillegg er det nødvendig å kontrollere andre variabler, som temperatur, inkubasjonstid, oksygenkonsentrasjon, CO ₂ , blant andre.

Ikke alle bakteriepopulasjoner trenger de samme kravene, selv om noen kan være vanlige for nesten alle, for eksempel at mediet inneholder peptoner, er det også sant at det er mer krevende mikroorganismer som i tillegg krever andre spesifikke stoffer, kalt vekstfaktorer.

For eksempel kan det nevnes at noen Haemophilus trenger tilstedeværelsen av faktor X (hemin) og faktor V (NAD) for å vokse.

Typer bakteriekulturer

Bakteriekulturer kan være polymikrobiell, ren eller blandet.

Polymikrobielle bakteriekulturer

Polymikrobielle kulturer er de som kommer fra såing av en prøve oppnådd fra et sted som har en normal mikrobiota, hvor også et visst patogen kan finnes.

Eksempel: Når man utvikler en halspinne-kultur, kan det være et patogen som Streptococcus pyogenes, men det vil være ledsaget av en vanlig mikrobiota i området.

I dette tilfellet er en god striering avgjørende for å tillate vekst av de forskjellige typer bakterier som er isolert.

Kolonien som har egenskaper som er kompatible med en Streptococcus pyogenes-stamme, blir nøye berørt med platinusløyfen og deretter plantet i et jomfruligt kulturmedium og således oppnå en ren kultur av den mikroorganismen.

Fra denne rene kulturen kan alle testene som er nødvendige for å identifisere bakteriene, utføres.

Ren bakteriekultur

For å identifisere en mikroorganisme på en effektiv måte, må man jobbe fra en ren kultur.

Rene kulturer kan oppnås som i tilfelle av det forrige eksempel ved å gjenplanting av en isolert koloni av en polymikrobiell kultur, eller når en prøve som kommer fra et normalt sterilt sted er plantet og bare ett patogen eksisterer (vekst av en enkelt type bakterier). Eksempel: når en CSF frøes fra en pasient med bakteriell hjernehinnebetennelse.

En annen måte er når man går igjen fra en gammel ren kultur for å få en fornyet ren kultur.

Blandede bakteriekulturer

Disse kulturene er sammensatt av en blanding av mikroorganismer, slik de forekommer i naturen. I noen industrielle prosesser er bruk av blandede kulturer praktisk.

Det kan oppnås gjennom forening av flere rene kulturer, siden disse tillater studier av bakterielle sammenhenger.

De er for eksempel nyttige i nedbrytningen av xenobiotika i industrielt avløpsvann, siden de fungerer som biologisk nedbrytbare midler.

Kjennetegn på bakteriekulturer

De morfologiske egenskapene til koloniene oppnådd i bakteriekulturer kan være veldig varierte.

Kolonier kan være veldig små, moderat eller store og kan virke tørre eller mykoid, blank eller kjedelig. Avhengig av tekstur, kan det variere mellom glatt og grovt, og avhengig av form kan de være sirkulære, flate, konvekse.

Avhengig av farge, kan de være: fargeløs, hvit, gul, rosa, fuchsia, rød, oransje, beige, gråaktig, grønnaktig, brun, svart eller med en metallisk glans, avhengig av bakteriene som er involvert og kulturmediet som brukes.

Grensene til koloniene kan være regelmessige eller uregelmessige. Andre på sin side kan presentere en ensartet film som er distribuert i nesten hele mediet som kalles "svermer". Dette er karakteristisk for Proteus sp.

Noen bakteriekulturer avgir lukt som er ganske karakteristisk for den involverte arten. For eksempel har en kultur av Pseudomonas aeruginosa en karakteristisk fruktlukt, mens slekten Proteus har en karakteristisk skjult lukt.

Eksempler på kolonier etter deres størrelse

Ekstremt lite: Mycoplasma pneumoniae, Francisella tularensis.

Liten: Streptococcus sp, Enterococcus sp.

Moderat: Enterobacteriaceae i familien

Stor: Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa.

Eksempel på kolonier etter utseende

Tørr: Lactobacillus confusus.

Mucoids: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Strålende: Klebsiella pneumoniae.

Ugjennomsiktig: Enterococcus faecalis, noen stammer av Neisseria gonorrhoeae.

Eksempler på kolonier i henhold til deres struktur

Glatte kolonier: Micrococcus luteus

Grove kolonier: Sarcina ventriculi på næringsagar.

Eksempel på kolonier etter deres form

Sirkulær: Listeria murrayi og Micrococcus luteus på næringsagar.

Flat: Staphylococcus equorum på næringsagar.

Konveks: Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae.

Eksempel på kolonier etter deres grenser

Avrundet kant: Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

Uregelmessig grense: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

Lobede kanter: Bacillus sp.

Eksempel på kolonier etter farge

Gjennomsiktig eller fargeløs: Shigella sp på XLD-agar.

Hvitt: Staphylococcus hominis på blodagar.

Beige: Bacillus sphaericus og Lactobacillus confusus på næringsagar.

Gul: Staphylococcus aureus og Elizabethkingia meningoseptica på blodagar, Pediococcus sp, Staphylococcus lentus på næringsagar,

Rosa: Escherichia coli på XLD-agar, Micrococcus roseus på næringsagar.

Fuchsia: Escherichia coli på Mac Conkey agar.

Fiolett: Chromobacterium violaceum.

Rødaktig: Serratia marcescens ved romtemperatur på næringsagar.

Oransje: Kurthia zopfii på næringsagar.

Gråaktig: Sporosarcina ureae i jordekstrakt agar.

Grønnaktig: Pseudomonas aeruginosa på BHI-agar.

Brun: Enterococcus sp på galle esculin agar.

Svart: Salmonella enteritidis på SS-agar.

Med metallisk glans: Escherichia coli på Endo agar.

Metoder for bakteriekultur

Fakultativ aerob eller anaerob bakteriekultur

Det er den mest brukte dyrkingsmetoden. Dette skyldes det faktum at de fleste bakterier som er sykdomsfremkallende for mennesker i utgangspunktet er aerobe eller fakultative anaerobe; og for det andre er det mye billigere og enklere enn anaerobe kulturer. Eksempel: Mycoplasma pneumoniae og Escherichia coli.

Anaerob bakteriekultur

Denne typen kultur krever fullstendig oksygenundertrykkelse. Kulturmedier for anaerobe bakterier bør generelt inneholde reduserende stoffer som: askorbinsyre, tioglykollat, cystein eller svovel for å eliminere de giftige virkningene av luftbåret oksygen.

Noen inneholder indikatorer som resazurin som er blå i nærvær av oksygen og fargeløs ved anaerobiose. Eksempel: Clostridium tetani.

Bakteriekultur ved mikroaerofili

Kulturplatene er plassert i en mikroaerofil hette med et tent lys, dekket. Stearinlyset forbruker oksygenet og går ut. I denne tilstanden vokser noen bakterier, for eksempel Streptococcus sp.

Materialer og krav

materialer

Materialene som kreves for å utføre en bakteriekultur er: petriskåler eller rør med kulturmedium eller buljong, platinaslynge, prøve, Bunsen-brenner eller stekeovn.

Krav for å utføre en bakteriekultur

Kulturen av bakterier krever mange elementer som må tas i betraktning, for eksempel næringsstoffene i mediet, pH, temperatur, oksygenkonsentrasjon, CO2, fuktighet, blant andre.

næringsstoffer

Bakteriekulturer krever kulturmedier som inneholder makroelementer og mikroelementer. Organiske stoffer som peptoner, aminosyrer, karbohydrater som kilder til karbon og nitrogen kan nevnes blant makroelementene.

Blant mikroelementene er uorganiske stoffer eller sporstoffer mangan, sink, nikkel, bor, klor, selen, silisium, kobolt, kobber, blant andre.

Hydrogenionkonsentrasjon (pH)

Konsentrasjonen av hydrogenioner (H ⁺ ) og hydroksylioner (OH ^- ) i mediet hvor kulturen skal utvikle seg er av vital betydning, da disse bestemmer pH.

Den mest brukte pH-verdien er nøytral (pH = 7,0), men det kan være midler der en sur eller alkalisk pH er praktisk, for eksempel hvis du vil isolere henholdsvis en acidofil eller alkalifofil bakterie.

Temperatur

Temperatur er en veldig viktig faktor som påvirker veksten av bakteriekulturer. Bakterier kan være psykrofile (vokse ved temperaturer <20 ° C, mesofile (mellom 20 ° C og 42 ° C)), termofile (40 ° C til 70 ° C), hypertermofile (70 ° C - 105 ° C).

Oksygenkrav

Aerob: de vokser i nærvær av oksygen.

Mikroaerofile: de vokser i nærvær av 5-10% CO _2.

Strenge anaerober: vokser i fravær av oksygen.

Fakultative anaerober: vokser i nærvær av oksygen eller uten den.

Aerotolerante: de vokser godt uten oksygen og tåler lite oksygen.

Kulturmedier

Kulturmedier er spesielle ernæringspreparater som tilberedes i laboratoriet for å oppnå mikrobiell vekst eller kultur. Disse mediene varierer i konsistens, sammensetning og funksjon. Hvert laboratorium vil forberede den type kulturmedium som passer deres behov.

Bakteriell kultursamling

Det er institusjoner eller organisasjoner som er dedikert til innsamling, karakterisering, vedlikehold og distribusjon av bakteriestammer av klinisk, miljømessig eller industriell betydning.

Disse stammene brukes til forskningsarbeid og for å utføre kvalitetskontroller på kulturmediene.

Eksempel: stammene American Type Culture Collection, Venezuelan Center for Collection of Microorganisms (CVCM) og stammer fra National Institute of Hygiene, Epidemiology and Microbiology of Cuba (INHEM).

referanser

1. Benavides G, Hermida A. Isolering og identifisering av naturlig bakterieflora fra jorda til Cruz Verde og Guasca páramos. (Cundinamarca). 2008. Bogotá. Tilgjengelig på: javeriana.edu.co/biblos
2. Hans S. Generell mikrobiologi. Omega-utgaver. 1991. Barcelona, ​​Spania. Tilgjengelig i: biolprocariotas.files
3. Weng Z, Junco R, Díaz R. Samling av mikrobielle kulturer: Merknader om deres utvikling. Rev Cubana Hig Epidemiol, 2003; 41 (1). Tilgjengelig på: scielo.sld.cu/scielo.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. utg. Redaksjonell Panamericana SA Argentina.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 utg. Redaksjonell Panamericana SA Argentina.