- Historie
- Hva er Benedict-reagenset for?
- Påvisning av glukose i urin
- Oppløsningsfarging
- Påvisning av forskjellige monosakkarider og disakkarider
- komponenter
- Fremgangsmåte for bruk
- Benedictts testreaksjon
- Utarbeidelse av Benedictts reagens
- referanser
Den Benedict 's reagens er en blå kobberoppløsning som anvendes for å påvise nærvær av reduserende sukker: aldehyder, a-hydroksy- ketoner og hemiketalene. Den ble utviklet av Stanley R. Benedict (1884-1936).
Alfa-hydroksy-keton-sukker karakteriseres ved å ha en hydroksylgruppe i nærheten av ketonet. I mellomtiden er en hemiketal en forbindelse som er resultat av tilsetning av en alkohol til et aldehyd eller keton. Benedictts reagens reagerer kritisk med alle disse reduserende sukkeretene.

Fargeleggene i reagensglassene etter tilsetning av Benedictts reagens lar oss vite semi-kvantitativt hvor mange reduserende sukkerarter som er oppløst. Kilde: Thebiologyprimer
Benedict's metode er basert på den reduserende virkningen av sukker på Cu 2+ , som er blå i fargen, som forvandler den til Cu + . Cu + danner et murrødt bunnfall av kopperoksid. Avhengig av konsentrasjonen av sukker, vises imidlertid et spekter av farger (øvre bilde).
Legg merke til at hvis Benedictts reagens blir tilsatt et reagensglass uten å redusere sukker (0%), opplever det ikke noen endring i sin blålige farge. Når konsentrasjonen er høyere enn 4%, blir reagensrøret farget brunt.
Historie
Reagenset ble opprettet av den amerikanske kjemikeren Stanley Rossiter Benedict i 1909, som publiserte sin vitenskapelige artikkel A-reagens for påvisning av reduksjon av sukker, i tidsskriftet J. Biol. Chem.
Videre publiserte Lewis og Benedict (1915) en metode for bestemmelse av å redusere sukker i blod ved å bruke pikrat som en indikator; men det ble avbrutt på grunn av manglende spesifisitet.
Benedictts reagens er veldig lik Fehlings. De skiller seg ut ved at Benedict bruker sitrationet og natriumkarbonatsaltet; mens Fehling bruker tartration og natriumhydroksyd.
Benedikt-testen er kvalitativ, det vil si at den bare oppdager tilstedeværelsen av reduserende sukker. Benedictts reagens kan imidlertid være kvantitativt hvis det har kaliumtiocyanat i oppløsning, som danner et hvitt bunnfall av kobbertiocyanat som kan titreres ved bruk av glukosestandarder.
Hva er Benedict-reagenset for?
Påvisning av glukose i urin
Benedictts reagens brukes fremdeles for å oppdage tilstedeværelse av glukose i urin og er en indikasjon på diabetes sykdom hos pasienten, hvis urin blir utsatt for Benedict-testen. Selv om det ikke kan utelukkes at glukosuri har en annen opprinnelse.
For eksempel finnes økt glykosuri ved tilstander som: graviditet, primær nyreglykosuri, renal tubulær acidose, primært eller sekundært Fanconi-syndrom, hyperaldosteronisme og akutt pankreatitt eller kreft i bukspyttkjertelen.
Benedictts reagens har blå farge på grunn av tilstedeværelsen av Cu 2+ , som reduseres til Cu + ved å redusere sukker. i dette tilfellet presipiterer glukose, og danner et mursteinrød kobber (I) oksid.
Oppløsningsfarging
Fargen og dannelsen av bunnfallet i Benedict-testen påført urin varierer avhengig av konsentrasjonen av det reduserende sukkeret. Hvis glukosekonsentrasjonen i urinen er mindre enn 500 mg / dL, blir løsningen grønn og det er ingen dannelse av bunnfall.
Glukosekonsentrasjon i urin på 500-1000 mg / dL forårsaker et grønt bunnfall i Benedict-testen. Ved en konsentrasjon over 1000 til 1 500 mg / dL, forårsaker det dannelse av et gult bunnfall.
Hvis glukosekonsentrasjonen er 1.500 - 2.000 mg / dL, vil et oransje bunnfall sees. Endelig er en konsentrasjon av glukose i urin større enn 2000 mg / dL, det vil føre til dannelse av et murrødt bunnfall.
Dette indikerer at Benedikt-testen har en semi-kvantitativ karakter og resultatet rapporteres ved bruk av kryss. Dermed tilsvarer for eksempel dannelsen av et grønt bunnfall et kors (+); og dannelsen av et mursteinrødt bunnfall tilsvarer fire kryss (++++).
Påvisning av forskjellige monosakkarider og disakkarider
Benedictts reagens oppdager tilstedeværelsen av reduserende sukkerarter som har en fri funksjonell gruppe eller en fri ketonfunksjonell gruppe, som en del av deres molekylstruktur. Dette er tilfelle for glukose, galaktose, mannose og fruktose (monosakkarider), så vel som laktose og maltose (disakkarider).
Sukrose og stivelse reagerer ikke med Benedictts reagens fordi de har frie reduserende grupper. I tillegg er det forbindelser som forstyrrer Benedikt-testen i urin, noe som gir falsk positivitet; slik er tilfellet salicylat, penicillin, streptomycin, levodopa, nalidixic acid og isoniazid.
Det er kjemikalier til stede i urinen som kan redusere Benedikt-reaksjonen; for eksempel: kreatinin, urat og askorbinsyre.
komponenter
Komponentene i Benedictts reagens er som følger: kobbersulfatpentahydrat, natriumkarbonat, trinatriumcitrat og destillert vann.
Kobbersulfat pentahydrat, CUSO 4 · 5H 2 O, inneholder Cu 2+ : det er den forbindelse som gir Benedict reagens sin blå farge. De reduserende sukkerarter virker på Cu 2+ , forårsaker dets reduksjon til Cu + og dannelsen av et mursteinsrødt bunnfall av kobberoksyd (Cu 2 O).
Natriumkarbonat genererer et alkalisk medium som er nødvendig for at reduksjonen av kobber skal finne sted. Natriumkarbonat reagerer med vann, og genererer natriumbikarbonat og hydroksylionet, OH - , som er ansvarlig for alkaliteten til mediet som er nødvendig for at den reduksjonsprosess skal kunne oppstå.
Natriumcitrat danner et kompleks med kobber (II) som forhindrer at det gjennomgår en reduksjon til Cu (I) under lagring.
Fremgangsmåte for bruk
5 ml av Benedictts reagens blir plassert i et 20 x 160 mm reagensglass og 8 dråper urin tilsettes. Reagensrøret ristes forsiktig og legges i en beholder med kokende vann i 5-10 minutter.
Etter denne tiden fjernes røret fra varmtvannsbadet og overflaten avkjøles med rennende vann for til slutt å ha avlesning av resultatet oppnådd når du utfører Benedict-testen (fargene).
Benedictts testreaksjon
Reduksjonen av Cu (II) under Benedict-testen kan skjematiseres som følger:
RCHO + 2 Cu 2+ (i kompleks) + 5 OH - => RCOO - + Cu 2 O + 3 H 2 O
RCHO = aldehyd; RCOO - = (karboksylation); Cu 2 O = kopperoksid, en mursteinsrød bunnfall.
Utarbeidelse av Benedictts reagens
173 gram natriumcitrat og 100 gram natriumkarbonat veies ut og oppløses sammen i 800 ml varmt destillert vann. Hvis det følges spor av uoppløste stoffer, må løsningen filtreres.
På den annen side blir 17,3 gram cupric sulfat pentahydrat oppløst i 100 ml destillert vann.
Deretter blandes de to vandige oppløsningene forsiktig, og kontinuerlig omrøring fortsettes, noe som utgjør opptil 1000 ml med destillert vann.
referanser
- Graham Solomons TW, Craig B. Fryhle. (2011). Organisk kjemi. Aminer. (10 th edition.). Wiley Plus.
- Clark J. (2015). Oksidasjon av aldehyder og ketoner. Gjenopprettet fra: chemguide.co.uk
- Wikipedia. (2020). Benedictts reagens. Gjenopprettet fra: en.wikipedia.org
- Redaksjonelt team. (9. januar 2019). Benedict's Test: Prinsipp, forberedelse av reagens, prosedyre og tolkning. Gjenopprettet fra: laboratoriuminfo.com
- Dr. Whitson. (SF). Benedictts reagens: En test for reduksjon av sukker. Gjenopprettet fra: nku.edu
