FORDYPNINGSOLJE: SAMMENSETNING, EGENSKAPER, BRUK - BIOLOGI - 2024

Den immersjonsolje er en viskøs klar væske med en brytningsindeks høy. Av denne grunn er det mye brukt i mikroskopiske observasjoner, siden det gir egenskapen til å konsentrere lys når det passerer gjennom mikroskopets 100X-mål, og øker dens oppløsningsevne.

Dette skjer fordi det dannes en tyktflytende film mellom objektivet og smøret, og forhindrer at lysstrålene sprer seg når de når luften, og konsentrerer lysstrålene mot prøven.

Dropper med olje nedsenking og mikroskop fokusert med 100X objektiv ved bruk av olje nedsenking. Kilde: Pixabay.com

Fordypningsolje brukes bare med 100X-målet. Det er derfor 100X-målet også kalles et fordypelsesmål. Resten er kjent som tørre mål. Dette objektivet kan ikke brukes uten fordypningsolje, da uten det ville visualiseringen ikke være tilfredsstillende.

Hovedfunksjonen til fordypningsolje er å gi klarere, skarpere og mer definerte bilder, slik at observasjon av detaljer som med andre linser ikke ville være mulig.

Den første oljen som ble brukt til dette formålet var anisolje, brukt sammen med den første nedsenkingslinsen opprettet av Giovanni Battista Amici. Dette forhindret bare kromatisk avvik, men økte ikke den numeriske åpningen til linsesystemet.

Deretter ble sedertreolje brukt, men det hadde mange ulemper som tvang dens misbruk. Blant dem var dens høye surhet, som skadet målene på kort sikt.

Deretter ble andre stoffer som vann og glyserin brukt inntil syntetiske nedsenkingoljer ble skapt, som litt etter litt ble raffinert til de nådde den nåværende nedsenningsoljen, som er en sammensatt blanding av organiske stoffer.

Sammensetning av fordypningsolje

Fordypningsoljen består av en blanding av organiske forbindelser som: terfenyl, hydrogenert terfenyl, naturlige hydrokarboner og polybutener.

Fordypningsoljeegenskaper

Immersjonsolje er en lys gul væske, lett viskøs i utseende, med en karakteristisk lukt og en tetthet på mellom 0,92 til 0,99 g / cm ³ .

Fordypningsolje er ikke løselig i vann, og har et kokepunkt på 340 ° C. Brytningsindeksen a (n 20 ° C / D): varierer fra 1,482 - 1,516. I mellomtiden er blitsindeksen 110 ° C og viskositeten varierer fra 100 til 120 mPa.s.

Dette produktet må kastes på riktig måte, da det er økotoksisk. Det er med andre ord skadelig for miljøet, hovedsakelig påvirker vannlevende dyr. På den annen side er det irriterende for huden og slimhinnene. Hvis den svelges er den nefrotoksisk og kardiotoksisk.

Fordypningsolje er stabil ved 15 til 25 ° C, temperaturen som den må lagres på.

Grunnleggende om fordypning olje

Når du bruker linser med større forstørrelse, bør lysets intensitet økes. Imidlertid går mange av lysstrålene tapt fordi de er spredt når de når luften (mellom rommet mellom dekkglippen og linsen), og til og med noen stråler reflekteres fullstendig.

Fordypningsolje har en brytningsindeks som ligner glass. Når oljen kommer i kontakt mellom 100X-objektivet og dekkglasset, konsentreres lysstrålene derfor.

De konsentrerte strålene passerer gjennom prøven og skjerper bildet, det vil si øke den numeriske åpningen til objektivet og korrigere for kromatiske og sfæriske avvik.

Bruksområder eller applikasjoner

Bruk av fordypningsolje er spesielt nødvendig når det er nødvendig å observere et bilde på en bredere måte, ved å bruke det høyeste forstørrelsesmålet (100X-målet) for å se detaljer som er essensielle for å etablere en diagnose.

Derfor er det mye brukt i mikroskopiske studier på forskjellige områder som: histologi, cytologi, hematologi og bakteriologi. For eksempel er det nyttig for å studere egenskapene til celler og vev hos en pasient.

Det brukes også til analyse av blodutstryk, der det er nødvendig å detaljere egenskapene til hemoparasitter i og utenfor erytrocyttene, så vel som i Gram-preparater, for å definere de morphotintorielle egenskapene til mikroorganismer.

Det brukes vanligvis i faste preparater, da det ikke anbefales i ferske preparater. Dette fordi overflatespenningen til oljen får dekkslippen til å bevege seg, noe som får prøven til å skifte under observasjon og forhindre analyse.

På den annen side er fordypningsolje ikke bare nyttig i konvensjonell lysmikroskopi: den brukes også i total indre refleksjonsfluorescens (TIRFM) mikroskop og i applikasjoner med konfokal fluorescens.

Fremgangsmåte for å observere et preparat som bruker nedsenkingolje

For å se et lysbilde under mikroskopet, bør lysbildet først fokuseres med det laveste forstørrelsesmålet, vanligvis 10X, med lav lysintensitet.

Deretter går det til 40X-målet, og lysløypa er litt økt. Noen analyser kan utføres ved denne forstørrelsen, men 100X forstørrelse er nødvendig for å se strukturelle detaljer.

Før du går over til 100X-målet, plasseres en dråpe nedsenkingolje på dekkglippen, rett der du vil observere, og deretter flyttes mikroskoptårnet for å finne 100x-målet i preparatet.

Lysets intensitet reguleres (økes) (ved å bevege kondensatoren og åpne membranen). Da bør noen få små bevegelser av mikrometerskruen (fremover eller bakover) fokusere perfekt hvis mikroskopet bruker parafokale mål.

Hvis du prøver å fokusere preparatet direkte med nedsenkingslinsen, kan du ha problemer med å finne fokuset. Det er ikke en umulig handling, men vanskelighetsgraden øker betydelig.

Omsorg

For å bruke fordypningsoljen, må visse forhold tas i betraktning.

Når det er laget et farget preparat, for eksempel en utstryking farget med Giemsa eller en Gram, må du vente på at utstrykningen tørker helt før du plasserer oljedypningen. Ellers vil oljen sammen med vannet danne miceller som ikke lar preparatet sees.

På den annen side, etter å ha observert mengden preparater, det vil si på slutten av arbeidsdagen, bør 100X-målet rengjøres nøye ved bruk av et linsepapir med etanol. Hvis linsen blir skitten, vil oljen tørke på den, og det vil være veldig vanskelig å fjerne den, og skade synsfeltet.

På samme måte må det tas med i betraktningen at oljen er brennbar og må holdes borte fra varmekilder (lightere). Det er viktig å unngå å varme den opp over 65 ° C.

Endelig er olje et giftig produkt. Derfor bør direkte kontakt med hud og slimhinner unngås, der det kan forårsake svak irritasjon. For å unngå ulykker, anbefales bruk av hansker og vernebriller for å håndtere det.

I tilfelle kontakt med oljen, bør området vaskes med mye vann. Hvis oljen spruter i øynene, bør den vaskes på samme måte, og hold øynene åpne. Ved utilsiktet inntak er det viktig å innta varmt vann og fremkalle oppkast, i tillegg til å gå til nærmeste lege.

referanser

1. "Total intern refleksjon fluorescensmikroskop." Wikipedia, The Free Encyclopedia. 30. des 2018, 22:46 UTC. 14. mai 2019, 01:54
2. IVD. Mikroskopi Olje nedsenking. Tilgjengelig på: Brukere / Team / Nedlastinger.
3. Miljøbiologi og mikrobiologi. Betjening av det optiske mikroskopet. Tilgjengelig på: eumed.net/libros.
4. Sánchez Lera Rita María, Oliva García Ninfa Rosa. Historien om mikroskopet og dens innvirkning på mikrobiologi. Rev Hum Med, 2015; 15 (2): 355-372. Tilgjengelig i: scielo.
5. Herrero J. Praksis nr. 1: Grunnleggende og bruk av det vanlige sammensatte optiske mikroskop. Universitat d´Alacant Tilgjengelig på: rua.ua.es/dspace
6. Scharlau - MSDS. Fordypningsolje, for mikroskopi. 2001. Tilgjengelig på: insumos-labcentral.