NÆRINGSAGAR: BEGRUNNELSE, TILBEREDNING OG BRUK - BIOLOGI - 2026

Den næringsagar er et ikke-selektivt medium og ingen differensiert fast kultur. Alle slags bakterier som ikke er krevende fra ernæringsmessig synspunkt, vokser i dette mediet.

Det er et enkelt medium, og til tross for navnet, inneholder det en lavere ernæringsverdi sammenlignet med andre lignende medier, som Brain Heart Infusion Agar eller Trypticase Soy Agar.

Koloni regner med næringsagar

Dets nytte i laboratoriet er veldig variert. Den brukes hovedsakelig til dyrking av arter, opprettholde stammer, telle kolonier, som et grunnlag for å tilberede blodagar, blant andre.

På grunn av sin lette beige farge, kan produksjonen av pigmenter som genereres av noen bakteriestammer unntaksvis skilles, for eksempel det grøngrønne pigmentet av Pseudomonas aeruginosa, det murte røde pigmentet produsert av Serratia marcescens ved romtemperatur, det gullgule pigmentet av Staphylococcus aureus, blant andre.

I tillegg er det et av de billigste voksende mediene som finnes på markedet.

Basis

Som allerede nevnt ovenfor, er det et veldig enkelt medium som er avhengig av å gi næringsstoffer for bakterievekst uten begrensninger og uten komplekse reaksjoner å tolke.

Siden mediet er gjennomskinnelig, er det ideelt å telle kolonier etter metoden med sådd.

sammensetning

Det er hovedsakelig sammensatt av kjøttekstrakt eller gjærekstrakt, peptoner eller gelatin-pankreas fordøyelse, agar-agar, natriumklorid og destillert vann.

Kjøtt- eller gjærekstraktet og peptonene representerer de essensielle kildene til karbon og mineraler (nitrogen, fosfor og svovel), som vil bli brukt av bakterier som en kilde til energi og vekstfaktorer.

På samme måte er agar-agar basen til alle faste kulturmedier, og kommer til å erstatte gelatin, som var den første baseforbindelsen som ble brukt av Robert Koch for å gi solid konsistens til media.

Agar er et polysakkarid sammensatt av galaktose, galactomannan, agarose og agaropectin. Den setter seg på 40 ° C og smelter nær 100 ° C.

For sin del gir natriumklorid mediet den osmolaritet som er nødvendig for bakterieutvikling.

Til slutt tjener vannet til å hydratisere og oppløse de lyofiliserte forbindelsene. Destillert vann justert til nøytral pH bør brukes. Kranvann skal ikke brukes fordi det inneholder kalsium og magnesium som kan reagere med fosfater i mediet og danne uoppløselige salter.

Forberedelse

For en liter næringsagar må 31 g av dehydrert medium veies. Legg den i en kolbe og oppløs i en liter destillert vann. Etter 5 minutters stående oppvarming over en varmekilde og bland den hele til den koker i 1 eller 2 minutter.

Utarbeidelse av kulturmedium.

Kolben blir deretter plassert i en autoklav og sterilisert ved 121 ° C i 20 minutter.

Sterilisering i autoklav

På slutten av tiden fjernes den fra autoklaven og serveres i sterile petriskåler ved bruk av en laminær strømningshette eller Bunsen-brenneren.

Hvis petriskålene er engangsbruk (plast), må mediet fordeles når agaren har en temperatur på omtrent 50 ° C, for å forhindre at deformeres av for stor varme.

La stivne og oppbevare på en omvendt plateholder og sett i kjøleskap ved 2-8 ° C til bruk.

Platene må herdes før de blir sådd. Ernæringsagarplater skal ikke brukes hvis de er forurenset eller dehydrert.

PH for det tilberedte mediet må justeres til 7,3 ± 0,2.

applikasjoner

Det er det enkleste kulturmediet som brukes i mikrobiologilaboratoriet. Dens formulering er utmerket for vekst av ikke-krevende bakterier.

De viktigste bruksområdene er forklart nedenfor:

Som grunnlag for fremstilling av blodagar

Dette mediet brukes noen ganger som en base for å fremstille blodagar, men det er ikke den mest brukte basen.

Stimulere sporuleringen av spordannende bakterier

Dette dyrkningsmediet er spesielt nyttig for å stimulere sporulering av spordannende bakterier som Bacillus sp.

For dette blir en stamme av Bacillus-slekten sådd og inkubert i 24 timer ved 37 ° C ved aerobiose. Når koloniene har vokst, blir platen utsatt for temperaturspenning, det vil si at ovnens temperatur økes til 44 ° C og får stå i ytterligere 24 timer eller settes i kjøleskap i 24 timer.

På slutten av tiden blir flekker av kulturen laget og beiset med Gram-flekker eller med Shaeffer-Fulton sporebeis. Baciller med endosporer (sporer inne i bacillus) og exosporer (sporer utenfor bacillus) vil bli observert i dem.

Sil vedlikehold

Noen forsknings- eller universitetsundervisningsstøttelaboratorier krever å opprettholde levedyktige bakterier av klinisk betydning så lenge som mulig, for å bruke bakteriebanken (bakterioteca) til forskningsarbeid eller for å utarbeide undervisningspraksis, der Studentene skal lære å manipulere og identifisere disse mikroorganismer.

Ernæringsagar, så vel som hjerneinfusjonsagar, kan brukes til dette formålet. Agaren tilberedes, helles i rør med et bakelitt lokk og vippes på en sokkel på en slik måte at agaren stivner og danner en blokk i bunnen og en skråkant på overflaten (fløytebeb).

Hvert rør er merket med navnet på bakteriene som skal frøes og datoen. Hver av bakteriene blir sådd på rammen og inkubert i 24 timer. Når koloniene har vokst, lagres rørene ved romtemperatur.

Bakteriotecaen må fornyes fra 1 til 3 måneder for å unngå forurensning og dehydrering av mediet og i tillegg til bakteriens død.

Bare ikke-kresen bakterier kan opprettholdes på denne måten.

Kolonitelling

Selv om det er spesialiserte midler for å telle kolonier, for eksempel standard teller agar, kan næringsagar brukes til dette formålet, enten ved overflatesåing med en drigalski-slikkepott eller ved dybde. Av denne grunn er det veldig nyttig i mikrobiologisk analyse av mat og vann.

Kjører diagnostiske tester

Fordi det er et medium som ikke inneholder blod, eller andre tilsetningsstoffer, er det ideelt å ta kolonier dyrket på dette mediet for å utføre katalasetesten.

På grunn av sin lette farge er det indikert at det skal utføres oksidasetester direkte på et område av agerfrøet, uten forstyrrelser.

Gjenvinning av mesofile aerober fra saltvann i rekreasjonsområdet (strender)

Næringsstoffagaren tilberedt med 10% sjøvann er nyttig for evaluering av mesofile aerober i strandvann.

På denne måten kan det virkelige nivået av forurensning som farvannet har med disse mikroorganismene forstås, siden resultatene i denne typen prøver overlappes ved bruk av kulturmedier fremstilt på konvensjonell måte.

Dette ble demonstrert av Cortez et al. i 2013 i et forskningsarbeid.

Dette kan forklares på grunn av den brå endringen som bakterier gjennomgår når de går fra et hypersalt miljø til et lite salt miljø, derfor kommer mikroorganismer inn i en tilstand av slapphet der de er levedyktige, men ikke dyrkbare.

referanser

1. "Ernæringsagar." Wikipedia, The Free Encyclopedia. 13 september 2016, 20:33 UTC. 29. des 2018, 21:04 en.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 utg. Argentina. Redaksjonell Panamericana SA
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. (5. utg.). Argentina, Redaksjonelt Panamericana SA
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Effekt av kulturmedier tilberedt med sjøvann på helseindikatorer i marine farvann i spaene i Chichiriviche, delstaten Falcón, Venezuela. Rev Soc Ven Microbiol 2013; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M og Cardoso M. Mikrobiologisk kvalitet på vann for inseminerende doser, for svin. Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktisk klinisk mikrobiologi. University of Cadiz, 2. utgave. UCA Publications Service.