ANTISTREPTOLYSIN O: KVANTIFISERING, BEGRUNNELSE, TEKNIKK, PATOLOGIER - BIOLOGI - 2026

Den O ASO er antistoff generert som reaksjon på en infeksjon forårsaket av Streptococcus pyogenes, også kjent som beta-hemolytiske Streptococcus A. Denne gruppe gir to eksotoksiner med hemolytiske aktivitet anrop streptolysins "S" og "O" .

Streptolysin S er ansvarlig for beta-hemolysen som oppstår i blodagar, og selv om den er giftig for visse celler i immunsystemet, er den ikke antigen. Mens streptolysin O, som er labilt mot oksygen, er ansvarlig for hemolysen som oppstår under blodagaren, og dette er antigen.

Streptococcus pyogenes / Diagram over hva som skjer i ASTO-testen (agglutineringsreaksjon). (Antistoffer bundet til latexpartikler som inneholder det spesifikke antigenet). Kilde: Bruker: Graham Beards / Alejandro Porto

Derfor, når cellene i immunsystemet interagerer med streptolysin O, produseres en spesifikk immunrespons, som genererer aktiveringen av B-lymfocytter. Disse cellene produserer antistoffer rettet mot streptolysin O. Derfor kalles antistoffene antistreptolysin O.

Streptococcus pyogenes produserer forskjellige patologier, blant dem er: betennelse i mandlene, erysipelas, impetigo, puerperal feber, skarlagensfeber og septikemi. Anti-streptolysin O-antistoffer vises 8 til 30 dager etter infeksjonsstart.

De fleste av disse infeksjonene er veldig vanlige i befolkningen, så det er vanlig at folk har antistreptolysin O-antistoffer i blodet. Lave titere indikerer en tidligere infeksjon med denne bakterien, men en høy eller stigende titre indikerer en nylig eller pågående infeksjon.

Kvantifisering av antistreptolysin O-antistoffer

På laboratoriet kan anti-streptolysin "O" antistofftiter måles gjennom en serologisk test. Antistreptolysin O (ASTO) -testen er basert på en agglutineringsreaksjon med latex.

Det kan gjøres semi-kvantitativt, rapportering i kryss eller titeren kan også kvantifiseres. Det er normalt og ikke signifikant å finne verdier opp til 200 IE / ml eller Todd-enheter / ml. Over denne verdien anses den som positiv og klinisk signifikant.

Denne testen krever ikke at pasienten er fastende. Serum brukes som en prøve, det vil si at pasientens blod blir trukket og plassert i et rør uten antikoagulant og deretter sentrifugert for å oppnå serum.

Grunnlag for ASTO-teknikken

Teknikken bruker latexpartikler som en støtte for å fikse streptolysin O-antigenet.De absorberte antigenpartiklene reageres med pasientens serum. Hvis pasienten har antistreptolysin O-antistoff, vil disse binde seg til antigenet som er festet til latexpartikkelen.

Denne bindingen forårsaker en agglutinering som er makroskopisk synlig. Reaksjonens intensitet er direkte proporsjonal med konsentrasjonen av antistoffer som er til stede.

teknikker

- Halvkvantitativ teknikk

Reaksjonens intensitet kan semi-kvantifiseres i kryss. For å gjøre dette tas en serologisk reaksjonsplate og plasseres:

50 ul serum og 50 ul ASTO-reagens. Bland godt med en tannpirker av tre og sett den i en automatisk mikser i 2 minutter. Observere. Hvis en automatisk rotator ikke er tilgjengelig, må den gjøres manuelt.

Tolkning

Suspensjon uten klumper (uniform): negativ

1. + = svak reaksjon

2. ++ = svak reaksjon

3. +++ = moderat reaksjon

4. ++++ = sterk reaksjon

Sera som er positive med 3 og 4 kryss kan kvantifiseres.

- Kvantitativ teknikk

For kvantifisering av titeren er det laget fortynninger 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

For å gjøre dette, fortsett som følger: 4 prøverør eller Kahn-rør blir tatt, og 0,5 ml fysiologisk saltløsning blir plassert på dem alle. Deretter tilsettes 0,5 ml pasientserum til det første røret. Blandes godt. Det røret tilsvarer 1: 2-fortynningen.

Deretter overføres 0,5 ml til rør 2 og blandes godt. Dette røret tilsvarer 1: 4-fortynningen og så videre, til ønsket fortynning er oppnådd.

Ta 50 ul av hver fortynning og reager med 50 ul ASTO-reagens på en agglutineringsplate, som forklart i den semikvantitative teknikken.

Tolkning

Den høyeste fortynning hvor synlig agglutinering blir observert blir tatt i betraktning. Beregningene blir utført som følger:

ASTO = Invers av den høyeste positive fortynningen x følsomheten til teknikken (konstant).

Eksempel: Pasient med positiv reaksjon opp til 1: 8

ASTO = 8 x 200 IE / ml = 1600 IE / ml eller Todd Units / ml.

Referanseverdi

Normal voksen person: opptil 200 IE / ml

Normale barn: opptil 400 IE / ml

anbefalinger

Det anbefales at det monteres en positiv og negativ kontroll med pasientene for å sikre at reagenset er i optimal tilstand. Hvis den positive kontrollen ikke agglutinerer eller den negative kontrollen agglutinerer, kan ikke reagenset brukes.

Reaksjonen må tolkes etter 2 minutter, etter denne tiden er den ikke gyldig hvis det er agglutinasjon. Dette er falske positiver.

Hyperlipemisk sera forstyrrer reaksjonen. De kan gi falske positiver.

En isolert ASTO-verdi er ikke veldig nyttig. Det må være ledsaget av symptomene.

Videre er det tilrådelig å utføre minst 2 ASTO-målinger når det er mistanke om revmatisk feber eller post-streptokokk glomerulonefritt, dette for å demonstrere økningen i antistreptolysin O-nivåer og dermed bekrefte diagnosen.

Patologier med høye antistreptolysin O-titere

Anti-streptolysin antistoffer økes etter å ha lidd en Streptococcus pyogenes eller gruppe A ß-hemolytisk Streptococcus infeksjon.

Blant dem er: akutt faryngitt, skarlagensfeber, impetigo, erysipelas, puerperal feber og septikemi.

Noen pasienter som har hatt nylig eller tilbakevendende streptokokkinfeksjoner, kan utvikle autoimmune sykdommer som en følge eller komplikasjon av post-streptokokkinfeksjon, for eksempel akutt glomerulonefritt og revmatisk feber.

Post streptokokk autoimmune sykdommer

Revmatisk feber

Det er en betennelseskomplikasjon eller følgetid som kan vises 1 til 5 uker etter å ha fått en streptokokkinfeksjon. Antistreptolysin O-titere øker betydelig 4 til 5 uker etter sykdomsdebut.

En høy ASTO-titer guider diagnosen, men er ikke relatert til alvorlighetsgraden av sykdommen, og dens reduksjon innebærer ikke bedring.

Antistreptolysin O-antistoffer kryssreagerer mot kollagen og muskelfibre, noe som påvirker visse organer (blant annet hjerte, hud, ledd og nervesystem).

Denne komplikasjonen eller følgene oppstår ved hjerteinvolvering, feber, ubehag, ikke-suppurativ trekkende polyartritt, chorea, etc.

Akutt glomerulonefritt

Akutt glomerulonefritt er en ikke-suppurativ følgetilstand som oppstår på grunn av avsetning av antigen-antistoffkomplekser i den glomerulære kjellermembranen.

Dannelse og sirkulasjon av antigen-antistoffkomplekser (ag-ac) generert av streptokokkinfeksjoner kan føre til ekssudative forandringer og betennelse i glomeruli, med proteinuria og hematuri.

Disse ag-ac-kompleksene blir avsatt i glomerulus og aktiverer komplementkaskaden, noe som resulterer i glomerulær endotelskade. Av denne grunn regnes det som en autoimmun sykdom, siden individets immunsystem skader sitt eget vev.

Antistreptolysin O-antistoffer er veldig høye og komplementnivåene er lave.

referanser

1. Wiener Laboratories. ASO latex. 2000. Tilgjengelig på: wiener-lab.com.ar
2. Wikipedia-bidragsytere. "Anti-streptolysin O." Wikipedia, The Free Encyclopedia. Wikipedia, The Free Encyclopedia, 23. Jan. 2019. Web. 19. juli 2019.
3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolysin O titer ved helse og sykdom: nivåer og betydning. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Tilgjengelig på: ncbi.nlm.nih
4. Sen E, Ramanan A. Hvordan bruke antistreptolysin O-titre. Arch Dis Child Educ Pract Ed. 2014; 99 (6): 231-8. Tilgjengelig på: ncbi.nlm.nih
5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. (5. utg.). Argentina, Redaksjonelt Panamericana SA
6. González M, González N. 2011. Manual of Medical Microbiology. 2. utgave, Venezuela: Direktoratet for medier og publikasjoner ved University of Carabobo.