LAKTOFENOLBLÅTT: EGENSKAPER, SAMMENSETNING, PREPARERING, BRUK - KJEMI - 2026

Den laktofenol blå eller blå bomull fremstilles med enkelt fargestoffegenskaper. Det brukes i kliniske laboratorier for å hovedsakelig farge soppstrukturer som hyfer, kimrør og sporer.

Det hjelper i den antatte eller foreløpige diagnosen visse sopp, men det er alltid lurt å forsterke diagnosen med mer spesifikke tester, for eksempel biokjemiske eller serologiske tester.

Grafisk fremstilling av laktofenolblå flekk, smørefarget med laktofenolblått, mikroskopmontert preparat. Kilde: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Laktofenolblått består av melkesyre, anilinblått, glyserin, fenol og avionisert vann. Den kan tilberedes på laboratoriet, eller den kan kjøpes klar til bruk. Når den er klargjort, er den klar til bruk, under ingen omstendigheter skal den fortynnes, da denne handlingen vil gi forferdelige resultater.

Konsentrasjonen av komponentene gjør den ideell for farging av soppstrukturer, siden fenol eliminerer den medfølgende bakterielle mikrobiotaen, mens melkesyre genererer en beskyttende film rundt soppstrukturen. Til slutt har anilinblått en tilhørighet til å feste seg til soppens strukturer.

Basis

Med laktofenolblått utføres en enkel farging av soppstrukturene i en viss mykologisk kultur. Det kalles enkelt fordi det bare bruker ett fargestoff.

Laktofenolblått, bortsett fra farging, fungerer også som en klargjøring av prøven, takket være leddvirkningen av melkesyre og fenol, i tillegg oppfører fenol seg som en mordant og forhindrer samtidig lysering av mikroorganismen ved å hemme de hydrolytiske enzymer som kan være til stede.

Mens melkesyre bevarer morfologien i soppstrukturene.

På den annen side har anilinblått egenskapen å feste seg eller binde til kitinholdige strukturer. Strukturene er farget lyseblå.

Det skal bemerkes at celleveggen til soppmikroorganismer, spesielt muggsopp, inneholder kitin, og det er derfor dette fargestoffet er ideelt for farging av disse mikroorganismer.

kjennetegn

Laktofenolblå løsning er et sterkt surt, lett overskyet, vandig fargestoff med en lyseblå farge. Den forblir stabil hvis den er lagret mellom 15 ° C og 25 ° C. Flasken må holdes ordentlig lukket. Det er irriterende og etsende på hud og slimhinner.

sammensetning

Formelen for å fremstille en liter laktofenolblå er som følger:

-250 g / L melkesyre

-1,0 g / L anilinblått eller metylblått

-500 g / L glyserin

-250 g / l fenol

-250 ml avionisert eller destillert vann.

Fenolen blir oppløst i det tidligere oppvarmede vannet. Melkesyre og glyserin tilsettes og blandes veldig godt. Til slutt oppløses anilinblå. Den blandes igjen og er klar til bruk.

Porsjonene for å fremstille 80 ml laktofenolblå løsning er:

-20 g fenolkrystaller

-20 ml melkesyre

-40 ml glyserin eller glyserol

-20 ml destillert vann.

Bruk

Det brukes til å farge soppstrukturer og gjennom de morfologiske egenskapene som er observert på mikroskopisk nivå, for å kunne stille en antagelig diagnose av soppen.

Prosess

Farging av soppstrukturer i kulturer

- Ta en ren kultur av soppen hvis strukturer skal overholdes.

- Arbeid helst i en laminar flow hette, eller under lighteren, ved bruk av en maske og hansker, siden det er nødvendig å overholde biosikkerhetsstandarder, fordi de fleste muggsopp er enkle å spre i miljøet og derfor representerer en fare for operatøren.

- En dråpe laktofenolblå er plassert på et lysbilde.

- Klipp en liten firkant av limbånd av god kvalitet og fester den veldig forsiktig til enden av det kalde steriliserte platinahåndtaket.

- Platinahåndtaket bringes nær den mest overfladiske delen av soppkolonien, og kulturen blir berørt veldig nøye, nøyaktig der limbåndet ligger.

- Deretter blir den ført til lysbildet og plassert rett på dråpen laktofenolblå, og pass på at teipen er perfekt forlenget og smurt med fargestoffet. Platinahåndtaket er veldig forsiktig fjernet.

- En annen dråpe laktofenolblått er plassert på båndet og et dekkglass på toppen. Ikke bruk for mye trykk for ikke å ødelegge strukturen til soppen, siden de er ekstremt skjøre. Fargestoffet skal få lov til å virke i omtrent 3 til 4 minutter.

- Etter denne tiden er preparatet klart til å bli observert under et mikroskop i forstørrelse 10X eller 40X. Hvis 100X observasjon er nødvendig, bør du bruke nedsenkingolje.

- Strukturen til soppen, generelt, er farget blå, med unntak av de dematiaceous soppene som vil beholde sin karakteristiske brune farge på denne typen sopp.

Direkte biologisk prøvefarging

Hvis det er nødvendig å studere en direkte biologisk prøve, slik som sputum, pus, ekssudater, sekresjoner, blant andre, må disse ha en tidligere prosedyre for dekontaminering av prøven. NaOH-løsning brukes til dette.

Ved hårprøver kan disse farges direkte.

Flere rammede hår (totalt 10) blir hentet fra de formodede tinea capitis lesjonene (alopekiske områder) og plassert på et lysbilde (3 til 4 hår per lysbilde). Noen få dråper laktofenolblått legges på toppen og dekkes umiddelbart med et dekkglass.

Ta tak i lysbildet med pinsett og varm forsiktig over en brenner. For å gjøre dette, gjør 3 til 4 raske pasninger gjennom flammen. Observer mikroskopet ved 40X og se etter sporer utenfor eller inne i håret (henholdsvis ectothrix eller endothrix). Tilsett eventuelt fordypningsolje og følg ved 100X.

Beisrørsfarging i identifisering av

Etter å ha inkubert den presumptive kulturen av Candida albicans i humant serum i 2 til 4 timer ved 37 ° C, blir en del av løsningen tatt og farget med laktofenolblått. Preparatet blir observert under mikroskopet ved 40X. Kimrøret er til stede og blastosporene farger knallblått.

Lactophenol sikkerhetsdatablad

The National Fire Protection Association (NFPA), oppretter sikkerhetsdatabladet for kjemiske stoffer med tanke på risikoen det representerer i henhold til forskjellige aspekter, disse er symbolisert ved en farget romb og et tall fra 0- fire.

Helsefare er identifisert i blått, brennbarhet i rødt, ustabilitet eller reaktivitet i gult, og enhver spesiell fare i hvitt.

Helse

Helserisikoen som laktofenolblå utgjør i henhold til NFPA er nivå 3. Dette betyr at stoffet er ekstremt farlig ved inntak eller i direkte kontakt med hud eller slimhinner.

Det er et sterkt etsende og irriterende stoff.

Ved kontakt med hud og slimhinner forårsaker det alvorlige forbrenninger.

Ved svelging kan det føre til hodepine, forvirring, slapphet, bevisstløshet, luftveisstans og til og med død.

brennbar

I følge NFPA er Lactophenol Blue vurdert til nivå 1 for brennbarhet. Dette betyr at den bare brenner hvis den varmes opp over 94 ° C.

ustabilitet

Oppført i henhold til NFPA på nivå 0 (null) når det gjelder reaktivitet. Dette betyr at den ikke har noen risiko for reaktivitet, det vil si at det er et kjemisk stabilt stoff.

Spesielle farer

Det gir ingen ekstra spesielle farer.

referanser

1. SAR laboratorium. Laktofenolblå. 2010. Tilgjengelig på: labsar.com.
2. Anvendt klinisk kjemilaboratorium. Laktofenolblått. 2015. Tilgjengelig på: cromakit.es
3. Merck Laboratories. Laktofenolblå mikroskopi i løsning. 2017. Tilgjengelig på: Brukere / Equipo / Nedlastinger
4. Nødkort. Laktofenolblå løsning for soppfarging. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Colombia. 2014. Tilgjengelig på: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Teknikk for farging av soppstrukturer med vegetabilske fargestoffer som et ikke-forurensende alternativ. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Tilgjengelig på: Redalyc.
6. Laboratorium Himedia. Lactophenol Cotton Blue. 2017. Tilgjengelig fra: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, Skuespiller J, Dasgupta A. Biokjemiske tester og fargingsteknikker for mikrobiell identifikasjon. Science Direct, 2017; 61-73. Tilgjengelig fra: Elsevier