STUART MEDIUM: FOUNDATION, KLARGJØRING OG BRUK - BIOLOGI - 2026

Den medium Stuart er en halvfast agar eller buljong uten næringsstoffer, anvendt for transport av biologiske prøver. Hensikten er å holde stammene i prøven levedyktige i en viss tid, men uten å øke den mikrobielle populasjonen.

Den ble opprettet av Moffet, Young og Stuart i 1948 og senere modifisert av Toshach og Patsula. Det er sammensatt av natriumglyserofosfat, natriumtioglykolat, kalsiumklorid og agar-agar. Sistnevnte er til stede i det halvfaste medium og fraværende i væsken. Noen laboratorier legger metylenblått til det.

Culturette med Stuart transport. Kilde: Av: CDC / Dr. Gilda Jones, høflighet: Public Health Image Library

De brukes vanligvis når det ikke er mulig å så prøven umiddelbart. I dette tilfellet plasseres prøven i transportmediet, mens den overføres til laboratoriet som vil behandle kulturen.

På denne måten er det garantert at de tilstedeværende mikroorganismer forblir i live til de blir inokulert i de tilsvarende kulturmediene.

Opprinnelig var bruken ment å transportere urinrørs- eller vaginalprøver der det var mistanke om tilstedeværelse av Neisseria gonorrhoeae. Senere innså de at nytten av den kunne være bredere.

Stuart-mediet viste seg å være meget effektivt når det gjelder bevaring av labile og raske mikroorganismer som Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, blant andre. I tillegg til andre ikke-irriterende mikroorganismer som Enterobacteria.

Stuart-mediet forhindrer i utgangspunktet uttørkingen av prøven, opprettholder den osmotiske balansen og bevarer mikroorganismene ved en ideell pH. På den annen side inneholder dette mediet strategisk ikke næringsstoffer, og hindrer derved mikroorganismer i å formere seg.

På markedet er det spesielle eksempler på transporttransportenheter som inneholder dette eller andre transportmidler, kalt culturette. De kan også tilberedes på laboratoriet.

Basis

Hensikten med Stuart-transportmåten er å holde prøvene så nær den opprinnelige tilstanden til de blir behandlet.

Natriumglyserofosfat og kalsiumklorid er et buffersystem som fungerer ved å opprettholde pH og osmolaritet.

I mellomtiden fungerer natriumtioglykollat ​​som et reduksjonsmiddel, og når det inneholder agar, gir det det en halvfast konsistens, for å forsinke oksygeneringen av mediet. Til slutt er metylenblått en oksidasjonsindikator, det vil si at den oppdager tilstedeværelsen av oksygen.

Det halvfaste mediet med redoksindikator er ideell for transport av prøver der det er mistanke om tilstedeværelse av anaerobe bakterier.

Kjennetegn på transportmidlene

Stuart-mediet, som alle transportmidler, oppfyller visse egenskaper, inkludert:

- Opprettholder levedyktige mikrobielle stammer til stede uten å multiplisere.

-Inneholder ikke næringsstoffer; Forbindelsene er rettet mot å holde prøven hydrert under tilstrekkelige pH- og osmolaritetsbetingelser.

-Hindrer autolysatet av noen delikate mikroorganismer, for eksempel Pneumococcus.

-Bruken er midlertidig, den skal ikke være for lang.

Forberedelse

Halvfast Stuart medium med redoksindikator

Hjemmeforberedelse

ingredienser

Natriumglyserofosfat 10 gr

Natriumtioglykollat ​​1,0 gr

Kalsiumklorid 0,1 gr

Metylenblå 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Destillert vann 1 liter

Bland komponentene og varm til de er helt oppløst. Hell i rør eller spesielle vattpinner. De føres inn i autoklaven og steriliseres ved 121 ° C i 15 minutter. La rørene avkjøles i vertikal stilling (i form av en blokk). Oppbevares ved romtemperatur.

Forberedelse med kommersielt medium

Vei 14,1 g av mediet i 1 liter destillert vann. Varm risting ofte til den er helt oppløst. Den kan kokes. Resten av prosedyren som allerede beskrevet.

Det dehydrerte mediet er kremfarget og tilberedt skal være blått på overflaten. Dette skyldes tilstedeværelsen av metylenblått.

PH i mediet må justeres til 7,4 ± 0,2

Flytende modifisert Stuart Medium (hjemmelaget)

ingredienser

Natriumglyserofosfat 10 gr

Natriumtioglykollat ​​1 gr

Kalsiumkloriddihydrat 0,1 gr

Destillert vann 1000 ml

Den har de samme ingrediensene som halvfast, men den har ikke agar, eller metylenblått. I dette tilfellet blandes komponentene uten oppvarming, og 0,5 ml fordeles i 16 x 125 mm rør med skruelokk.

Det steriliseres i en autoklav ved 121 ° C i 10 minutter. For prøvetaking bør dacron-vattpinner brukes hvis prøven er til PCR eller rayon hvis det er for kultur.

Rørene lagres ved romtemperatur.

applikasjoner

Kommersielt er det spesielle prøveutstyrsenheter som kalles kulturette; Denne enheten er et langstrakt, tynt rør som har en vattpinne inni og på enden er det et segment som inneholder det halvfaste eller flytende Stuart-mediet.

Enheten åpnes og prøven tas med vattpinnen. Den føres deretter tilbake i røret til spissen av vattpinnen settes inn i det halvfaste transportmediet; Noen har med seg en polyuretan-svamp impregnert med det flytende Stuart-mediet, som prøven blir bevart når den holdes våt.

I tilfelle det er mistanke om tilstedeværelse av delikate mikroorganismer, bør bomullspinner med trekull brukes til å samle prøven.

Prøvene som kan tas med vattpinner eller vattpinner og overføres i dette mediet er svelgeksudater, rektal vattpinner og forskjellige sekreter, blant dem: vaginal, uretral, sår, okulær, otisk og abscess.

Under overføring av prøven i transportmediet til laboratoriet, må mediet utsettes for ekstreme miljøforhold (for kaldt eller for varmt). Plutselige endringer i atmosfæretrykket bør også unngås.

Tidspunktet hvor mediet er i stand til å holde en mikroorganisme levedyktig, vil avhenge av den aktuelle belastningen. For mikroorganismer av slekten Neisserias og Haemophilus kan de for eksempel forbli levedyktige i opptil 24 timer, men stammer som Salmonella eller Shigella kan vare i dager og til og med uker.

Hvis det anslås at behandlingen av prøven kan ta mer enn 4 dager, er det foretrukket å fryse prøven ved -70 ° C.

Identifikasjon av prøven i transportmidler

De forberedte transportmidlene eller den kommersielle kulturetten må ha en etikett der følgende informasjon blir plassert:

Pasientens for- og etternavn: unngår forvirring av prøver.

Identifikasjonsnummer: det er praktisk å holde en ordre på jobb.

Prøveinnsamlingskilde: hjelper bakteriologen til å velge riktig kulturmedium.

Deltakende lege: Noen ganger er det nødvendig for mulige konsultasjoner.

Dato og tid for prøveinnsamling: det er nødvendig for aksept eller avvisning av prøven i henhold til tiden som er gått mellom samlingen av prøven og mottakelsen på laboratoriet.

Annen informasjon som vil være veldig nyttig å legge ved er:

Den presumptive diagnosen: guider tilsetningen av spesielle kulturmedier i henhold til den mistenkte diagnosen.

Antibiotikumbehandling: det er nyttig å bli annektert i antibiogrammet.

All denne informasjonen er avgjørende for å sikre korrekt prøvebehandling.

QA

For å evaluere ytelsen til Stuart-mediet kan kjente stammer inokuleres og holdes ved 25 ° C, så som: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus 6301.

I alle tilfeller forventes det å gjenvinne den aktuelle mikroorganismen, bevart i 24 timer.

På den annen side kan andre stammer brukes som: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 og EschCerichia coli.

I alle tilfeller forventes rikelig utvinning i opptil 96 timer.

begrensninger

Noen studier forsikrer at glyserofosfat som er tilstede i Stuart-mediet, kan metaboliseres av noen coliforms, blant andre Gram-negative bakterier, og derfor formerer seg i dette mediet.

Denne risikoen øker jo lenger prøvebehandlingen er forsinket. På samme måte påvirker eksponeringen av Stuart-mediet for høye temperaturer under transport dette.

referanser

1. "Transportmiddel (mikrobiologi)." Wikipedia, The Free Encyclopedia. 13 apr 2018, 10:36 UTC. 1. april 2019. Tilgjengelig på: es.wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Culture Media. Stuart Transport. Tilgjengelig på: Tilgjengelig på: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Stuarts transportmiddel. Tilgjengelig på: lablinsan.cl
4. Vitenskapelig MDM. Fordelene med å ha Stuart mikrobiologisk transportmedium. Tilgjengelig på: mdmcientifica.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017. Tilgjengelig på: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 utg. Redaksjonell Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. utg. Redaksjonell Panamericana SA Argentina.