MØRKET FELTMIKROSKOP: EGENSKAPER, DELER, FUNKSJONER - BIOLOGI - 2026

Det mørke feltmikroskopet er et spesielt optisk instrument som brukes i visse laboratorier. Dette er resultatet av en modifikasjon gjort til lysfeltmikroskopi. Darkfield-mikroskopi kan oppnås ved trans-belysning eller ved epi-illumination.

Den første er basert på å blokkere lysstrålene som kommer direkte inn i kondensatoren, ved bruk av enheter som interponerer før lysstrålene når kondensatoren.

Mørkefeltmikroskop / Treponemes sett i mørkefeltmikroskop. Kilde: Dietzel65 / Judith Miklossy, Sandor Kasas, Anne D Zurn, Sherman McCall, Sheng Yu og Patrick L McGeer

Det mørke feltet med overført lys gjør det mulig å fremheve strukturene og kunne observere ekstremt tynne partikler. Strukturer sees med noe brytning eller lysstyrke på en mørk bakgrunn.

Mens epi-illuminasjonseffekten oppnås med tilfeldig eller skrått lys. I dette tilfellet må mikroskopet være utstyrt med et spesielt halvmåneformet filter.

Med hendelsesbelysning er de observerte strukturer preget av å presentere en visuell effekt i høy relieff. Denne egenskapen gjør det mulig å fremheve kantene på de suspenderte partiklene.

I motsetning til Brightfield-mikroskopi, er darkfield-mikroskopi spesielt nyttig for å visualisere fresker som inneholder suspenderte partikler, uten farging.

Imidlertid har det flere ulemper, inkludert at det ikke kan brukes til tørre preparater eller fargede preparater. Den har ikke en god oppløsning. I tillegg, for å sikre et godt bilde, kan den numeriske åpningen av målene ikke overstige kondensatorens.

kjennetegn

Sammensetningen av det mørke feltmikroskopet presenterer viktige modifikasjoner med hensyn til det lyse feltet, siden grunnleggende for begge mikroskopiene er motsatte.

Mens i det lyse feltet er lysstrålene konsentrert slik at de passerer direkte gjennom prøven, i bjelkene er det spredt slik at bare de skrå bjelkene når prøven. Disse blir deretter spredt av den samme prøven, og overfører bildet mot målet.

Hvis du skulle fokusere på et lysbilde uten en prøve, ville en mørk sirkel observert, siden uten en prøve er det ingenting som sprer lyset mot målet.

For å oppnå ønsket effekt i synsfeltet, er bruk av spesifikke kondensatorer nødvendig, samt membraner som hjelper til med å kontrollere lysstrålene.

I et mørkt synsfelt virker elementene eller partiklene i suspensjon lyse og brytbare mens resten av feltet er mørkt, noe som gir en perfekt kontrast.

Hvis det brukes skrått eller innfallende lys, oppnås en kanteffekt med stor lettelse i de observerte strukturer.

Deler av darkfield-mikroskopet

Kilde: amazon.com

-Mekanisk system

Rør

Det er enheten som bildet reflekteres og forstørres av objektivet gjennom til det når okularet eller okularene.

Røre

Det er støtten der de forskjellige målene ligger. Målene er ikke faste, de kan fjernes. Revolveren kan roteres på en slik måte at målet kan endres når operatøren trenger det.

Makroskrue

Denne skruen brukes til å fokusere prøven, den beveger seg fremover eller bakover for å bringe prøven nærmere eller lenger fra målet, og bevegelsen er grotesk.

Mikrometerskrue

Mikrometerskruen beveges fremover eller bakover for å flytte prøven nærmere eller lenger fra målet. Den mikrometriske skruen brukes til veldig fine eller delikate bevegelser, nesten umerkelige. Det er den som oppnår det ultimate fokuset.

Platen

Det er støtten der prøven vil hvile på lysbildet. Den har en sentral åpning som lysstrålene passerer gjennom. Når makro- og mikrometerskruene flyttes, går scenen opp eller ned, avhengig av bevegelsen til skruen.

Bilen

Vogna gjør det mulig å krysse hele prøven med målet. De tillatte bevegelsene er frem og tilbake og omvendt, og fra venstre mot høyre og omvendt.

Holder tang

Disse er plassert på scenen, er laget av metall og er ment å holde lysbildet for å forhindre at det ruller under observasjon. Det er viktig at prøven forblir fast mens den observeres. Festene er nøyaktig i størrelse for å motta lysbildet.

Arm eller håndtak

Armen skjøter røret med basen. Dette er stedet der mikroskopet skal holdes når du beveger deg fra den ene siden til den andre. Med den ene hånden gripes armen og basen holdes med den andre hånden.

Sokkel eller fot

Som navnet tilsier, er det basen eller støtten til mikroskopet. Takket være basen er mikroskopet i stand til å holde seg fast og stabilt på en flat overflate.

-Optisk system

mål

De er sylindriske i formen. De har en linse i bunnen som forstørrer bildet som kommer fra prøven. Målene kan være av forskjellige forstørrelser. Eksempel: 4,5X (forstørrelsesglass), 10X, 40X og 100X (nedsenkingsmål).

Nedsenkingsmålet er så navngitt fordi det krever plassering av noen dråper olje mellom objektivet og prøven. De andre kalles tørre mål.

Målene skrives ut med de egenskapene de har.

Eksempel: produsentmerke, feltkurvingskorreksjon, aberrasjonskorreksjon, forstørrelse, numerisk blenderåpning, spesielle optiske egenskaper, nedsenkingsmedium, rørlengde, brennvidde, dekkglass tykkelse og koding farge.

Linsene har en frontlins som er plassert i bunnen og en baklins som er plassert øverst.

okularer

Gamle mikroskop er monokulære, det vil si at de bare har ett okular, og moderne mikroskop er kikkert, det vil si at de har to okularer.

Okularene er sylindriske og hule i form. Disse har konvergerende linser inni som utvider det virtuelle bildet som er laget av linsen.

Okularet blir med i røret. Sistnevnte lar bildet som sendes av objektivet nå okularet, som vil forstørre det igjen.

Okularet i den øvre delen inneholder en linse som kalles et okular, og i den nedre delen rommer den en linse som kalles en samler.

Den har også en mellomgulv, og avhengig av hvor den ligger, vil den ha et navn. De som er plassert mellom begge linsene kalles Huygens okular, og hvis den er plassert etter de 2 linsene, kalles det Ramsden okular. Selv om det er mange andre.

Forstørrelsen av okularet varierer mellom 5X, 10X, 15X eller 20X, avhengig av mikroskop.

Det er gjennom okularet eller okularene at operatøren kan se prøven. Noen modeller har en ring på venstre okular som er bevegelig og tillater bildejustering. Denne justerbare ringen kalles en diopterring.

-Lys system

Lampe

Det er kilden til belysning og er plassert i bunnen av mikroskopet. Lyset er halogen og sendes ut nedenfra og opp. Generelt er lampen som mikroskop har 12 V.

membran

Membranen til mørke feltmikroskop mangler iris; i dette tilfellet forhindrer dette strålene fra lampen fra å nå prøven direkte, bare de skrå bjelkene vil berøre prøven. De bjelkene som er spredt av strukturene som er tilstede i prøven, er de som vil passere målet.

Dette forklarer hvorfor strukturer ser lyse og lysende ut i et mørkt felt.

kondensator

Kondensatoren til et mørkt feltmikroskop skiller seg fra det for et lyst felt.

Det er to typer: brytningskondensatorer og refleksjonskondensatorer. Det siste på sin side er delt inn i to kategorier: paraboloider og kardioider.

Brytningskondensatorer

Denne typen kondensator har en skive som er plassert for å bryte lysstråler, den kan være plassert over frontlinsen eller på baksiden.

Det er veldig enkelt å improvisere en kondensator av denne typen, siden det er nok å plassere foran kondensatorens frontlinser en skive laget av svart papp som er mindre enn linsen (membranen).

Et lysfeltlysmikroskop kan konverteres til et mørkefeltmikroskop ved hjelp av dette tipset.

Refleksjonskondensatorer

Det er de som brukes av stereoskopiske mikroskop. Det er to typer: paraboloider og kardioider.

• Paraboloider: De har en type krumning kalt paraboloider på grunn av deres likhet med en parabola. Denne typen kondensator er mye brukt i studien av syfilis, siden den gjør det mulig å observere Treponeme.
• Kardioid : kondensatorens krumning ligner et hjerte, derav navnet "kardioid", kondensatoren har samme navn. Den har en membran som er justerbar.

Egenskaper

-Det brukes til å undersøke tilstedeværelsen av Treponema pallidum i kliniske prøver.

-Det er også nyttig å observere Borrelias og Leptospiras.

-Det er ideelt for å observere in vivo-oppførsel til celler eller mikroorganismer, så lenge det ikke er nødvendig å detaljspesifisere strukturer.

-Det er ideelt å fremheve kapselen eller veggen til mikroorganismer.

Fordel

-Markmikroskop med en brytningskondensator er billigere.

-Den bruk er veldig nyttig i 40X forstørrelse.

-De er ideelle for å observere prøver som har en brytningsindeks som ligner på mediet der de finnes. For eksempel celler i kultur, gjær eller motile bakterier som spirocheter (Borrelias, Leptospiras og Treponemas).

-Cellen kan observeres in vivo, noe som gjør det mulig å evaluere atferden. For eksempel Brownsk bevegelse, bevegelse etter flagella, bevegelse ved utslipp av pseudopoder, prosess med mitotisk inndeling, klekking av larver, spiring av gjær, fagocytose, blant andre.

-Det gjør det mulig å fremheve kantene på strukturene, for eksempel kapsel og cellevegg.

-Det er mulig å analysere oppdelte partikler.

-Bruk av fargestoffer er ikke nødvendig.

ulemper

-Spesiell forsiktighet må utvises når montering av preparatene, for hvis de er for tykke, vil den ikke overholdes godt.

-Oppløsningen på bildene er lav.

-Markmikroskop som bruker brytningskondensatorer har en veldig lav lysprosent.

-For å forbedre bildekvaliteten med et nedsenkingsmål (100X), er det nødvendig å redusere den numeriske åpningen til målene og dermed øke den til den lysende kjeglen. For dette er det viktig å innarbeide en ytterligere membran som kan regulere den numeriske åpningen til målet.

-Du kan ikke visualisere tørre preparater eller fargede preparater, med mindre det er viktige fargestoffer.

-Det tillater ikke visualisering av visse strukturer, spesielt interne.

-Markmikroskop er dyre.

referanser

1. "Mørkefeltmikroskop." Wikipedia, The Free Encyclopedia. 26. august 2018, 00:18 UTC. 30. juni 2019, 01:06
2. Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. Diagnose av leptospirose fra blodprøver og kultur ved observasjon under et mørkt feltmikroskop. Biomedical. 2008; 28 (1): 7-9. Tilgjengelig fra: scielo.org
3. Rodríguez F. Typer av optiske mikroskop. Klinisk og biomedisinsk laboratorieblogg. Tilgjengelig på: franrzmn.com
4. Wikipedia-bidragsytere. Mørkefeltmikroskopi. Wikipedia, The Free Encyclopedia. 19. oktober 2018, 00:13 UTC. Tilgjengelig på: wikipedia.org
5. Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B. En evaluering av mørkefeltmikroskopi, kultur og kommersielle serologiske sett i diagnosen leptospirose. Indiske J Med Microbiol. 2015; 33 (3): 416-21. Tilgjengelig på: nlm.nih.gov