BIOKJEMISKE TESTER: TYPER, HVA DE ER FOR OG VIKTIGHET - BIOLOGI - 2026

De biokjemiske testene i mikrobiologi er et sett med testkjemikalier som blir ført til mikroorganismer som er tilstede i en prøve for å identifisere dem ; Disse mikroorganismer er vanligvis bakterier. Det er et stort antall biokjemiske tester tilgjengelig for en mikrobiolog.

Valget av disse testene er imidlertid basert på foreløpige funn, for eksempel Gram-flekkemønster og veksttrekk, som gjør det mulig å tilordne bakteriene til en bestemt kategori. Biokjemiske tester er hovedsakelig basert på de metabolske egenskapene til hver bakterietype.

Ikke alle bakterier har de samme egenskapene, så det undersøkes om de har noe spesielt enzym ved å tilsette underlaget og vente på at reaksjonen skal skje. Vanligvis er denne bestemmelsen gitt ved en endring i farge eller pH i kulturmediet.

Mindre enn 15 biokjemiske tester er ofte nødvendige for pålitelig identifisering av en bakterie ned til artsnivået. Å utføre flere biokjemiske tester kan øke tilliten til identifikasjonen.

De fleste av disse biokjemiske testene blir utført på serum eller blodplasma. Imidlertid kan de også utføres på andre biologiske sekreter som: urin, cerebrospinalvæske, pleuralvæske og avføring, blant andre.

Klassifisering

Biokjemiske tester kan klassifiseres i tre grupper:

Universell

Det er testene som kan utføres på en hvilken som helst prøve, og som veileder mikrobiologen om følgende biokjemiske tester som må utføres for å få en pålitelig identifikasjon.

Eksempel

Katalase- og oksidasetest.

differensialer

De er testene som er utført for å identifisere mikroorganismer som er tilstede i prøven helt ned til artsnivået.

Identifikasjon gjøres basert på resultatene fra en kombinasjon av tester, ettersom individuelle resultater ikke er informative nok til å identifisere.

Eksempel

IMViC-tester og sukkerutnyttelsestester.

Spesifikk

De er spesifikke tester for et bestemt sett av arter eller for å subtype en art. Disse testene blir vanligvis utført for å bekrefte eller identifisere på underarten. De individuelle testene er informative i seg selv.

Eksempel

Y-Glutamyl-aminopeptidasetesten.

Typer biokjemiske tester

Katalasetesten

Katalasetesten er en test for å demonstrere tilstedeværelsen av katalaseenzym ved å bryte ned hydrogenperoksyd til oksygen og vann. En liten mengde bakterier blir tilsatt en dråpe hydrogenperoksyd (3%) på lysbildet.

Katalasetesten er en enkel test brukt av mikrobiologer for å hjelpe til med å identifisere bakterierter og for å bestemme evnen til noen mikrober til å bryte ned hydrogenperoksyd ved å produsere enzymet katalase.

Hvis man observerer oksygenbobler, betyr det at bakteriene har enzymet katalase, fordi det katalyserer nedbrytningen av hydrogenperoksyd til oksygen og vann. Organismen sies da å være katalasepositiv (f.eks. Staphylococcus aureus).

Oksidasetesten

Denne testen brukes til å identifisere mikroorganismer som inneholder enzymet cytokromoksidase (viktig i elektrontransportkjeden). Det brukes ofte for å skille mellom Enterobacteriaceae- og Pseudomadaceae-familiene.

Cytokromoksidase overfører elektroner fra elektrontransportkjeden til oksygen (den endelige elektronakseptoren) og reduserer den til vann. Kunstige elektrondonor- og akseptormolekyler er gitt i oksidasetesten.

Når elektrondonoren oksideres ved hjelp av cytokromoksydase, blir mediet mørk lilla og anses som et positivt resultat. Mikroorganismen Pseudomonas aeruginosa er et eksempel på en oksidase-positiv bakterie.

Saltet Mannitol Agar (MSA) test

Denne typen tester er både selektiv og differensiell. MSA vil velge organismer som kan leve i miljøer med høye saltkonsentrasjoner, for eksempel Staphylococcus-arter i motsetning til Streptococcus-arter, hvis vekst er hemmet under disse forholdene.

Differensialkomponenten i denne testen er mannitolsukker. Organismer som kan bruke mannitol som matkilde vil produsere biprodukter fra gjæring, som er sure og dermed senke pH-verdien i mediet.

Surhetsgraden til mediet fører til at pH-indikatoren, fenolrød, blir gul. Eksempler på arter av bakterier som kan differensieres ved denne metoden er: Staphylococcus aureus (positiv fordi den gjærer mannitol) og Staphylococcus epidermidis (negativ fordi den ikke gjærer mannitol).

Koagulasetest

Koagulase er et enzym som hjelper blodpropp i blodet. Denne testen blir utført på Gram-positive og katalasepositive bakterier for å identifisere Staphylococcus aureus (koagulase-positiv). Faktisk er koagulase en virulensfaktor av denne bakteriearten.

Koagulasjonsdannelse rundt en infeksjon forårsaket av denne bakterien beskytter sannsynligvis den mot fagocytose. Denne testen er veldig nyttig når du vil skille Staphylococcus aureus fra andre Staphylococcus-arter som er koagulase-negative.

Ureasetesten

Denne testen brukes til å identifisere bakterier som er i stand til å hydrolysere urea ved å bruke enzymet urease. Det brukes ofte for å skille slekten Proteus fra andre enteriske bakterier.

Hydrolyse av urea produserer ammoniakk som et av produktene. Denne svake basen øker pH i mediet over 8,4 og pH-indikatoren (fenolrød) endres fra gul til rosa. Et eksempel på en urease-positive bakterier er Proteus mirabilis.

Hva er biokjemiske tester for?

Biokjemiske tester i mikrobiologi brukes til å diagnostisere sykdommer forårsaket av mikrober og for å overvåke behandlinger som er administrert for å bekjempe dem. I tillegg brukes de til screening av smittsomme sykdommer og for deres prognose.

Den biokjemiske identifiseringen av mikroorganismer gir en ide om hva disse mikroorganismer er i stand til, og er mulig å diskriminere forskjellige stammer av samme art etter spesifikke biokjemiske profiler.

Forskjeller i spesifikke enzymaktiviteter informerer mikroorganismens økologi, fysiologi eller naturlige habitat, som i noen tilfeller kan anses som viktig informasjon.

Betydning

Strukturelle forskjeller i form, størrelse og arrangement av bakterier hjelper lite i identifiseringsprosessen, fordi det er mange arter av bakterier som har samme form, størrelse og arrangement.

Av denne grunn er identifisering av bakterier til syvende og sist først og fremst basert på forskjeller i deres biokjemiske aktiviteter.

Hver bakterieart har et veldefinert sett med metabolske aktiviteter som er forskjellige fra alle andre arter. Disse biokjemiske "fingeravtrykkene" er egenskaper som kontrolleres av bakterielle enzymer.

Dermed er biokjemiske tester viktige fordi de hjelper forskeren med å identifisere patogenene som er tilstede i en prøve, og på denne måten å kunne anbefale riktig behandling til pasienten.

referanser

1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Clinical Biochemistry (8. utg.). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, PH, & Cowan, ST (1952). Biokjemiske metoder for bakteriologi. Journal of General Microbiology, 6 (1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Clinical Biochemistry (5. utg.). Elsevier Health Sciences.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Praktisk håndbok for mikrobiologi (2. utg.). CRC Press.
5. Harrigan, W. (1998). Laboratory Methods in Food Microbiology (3. utg.). Academic Press.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Praktisk mikrobiologi. BI Publications Pvt Ltd.