KRYSSPRØVER: HVA ER DE FOR, TEKNIKK, BEGRUNNELSE, FASER - MEDISIN

Den kryssmatching er en rekke laboratorieforsøk ble utført for å bestemme om blodprodukter fra en donor (hovedsakelig fullblod og pakket globulære) som er kompatible med blodet til mottakeren.

Det er en ekstra komplementær test til ABO-kompatibilitet og Rh-faktor. Årsaken til kryssstemming er at noen ganger to individer (givermottaker) kan ha den samme ABO- og Rh-gruppen, men fortsatt er blodet deres uforenlig.

Kilde: unsplash.com

Slik inkompatibilitet skyldes tilstedeværelsen av antistoffer mot en serie røde blodcelleproteiner kjent som mindre antigener. Disse antigenene blir ikke rutinemessig testet som for blodgruppe (ABO) og Rh-faktor.

Dette er fordi de mindre antigenene er mye sjeldnere og har et variabelt uttrykk hos hvert individ, derfor er det praktisk talt umulig å gruppere dem i kategorier slik det gjøres med gruppen og Rh-faktoren.

I stedet blir røde blodceller fra donorer blandet med pasientserum (major match test) og røde pasientceller med donorserum (mindre match-test) for å påvise tilstedeværelsen av antigen-antistoffreaksjoner.

Når det er antistoffer mot mindre antigener, enten i pasientens eller giverens serum, sies testen å være positiv, så i de fleste tilfeller kan den spesielle blodenheten ikke overføres.

ABO Group

For å forstå hva kryssreaksjoner handler om, må du først vite det grunnleggende om blodgrupper.

I denne forstand er det viktigste å vite at blod kan klassifiseres i fire grupper: A, B, AB og O.

Hver av disse gruppene uttrykker et bestemt protein (antigen) på overflaten av de røde blodlegemene, som identifiseres som et fremmed element av antistoffene fra en potensiell reseptor fra en annen gruppe.

Det mest påfallende med antigen-antistoffreaksjoner ved blodmatching er at det ikke er nødvendig med noen tidligere eksponering for antigenet for at antistoffer skal eksistere. Dette er kjent som naturlige antistoffer.

Naturlige antistoffer

Generelt, for at antistoffer skal eksistere i et individs kropp, er det nødvendig at de hvite blodcellene til individet tidligere har blitt eksponert for antigenet.

Dette betyr at det i den første kontakten mellom det fremmede antigenet og organismen ikke er noen antistoffer, siden disse genereres senere, etter den første kontakten. Derfor er det umulig for immunsystemet å ha antistoffer mot for eksempel et bestemt virus, hvis det ikke har blitt utsatt for det tidligere.

Det eneste unntaket fra de ovennevnte er anti-AB antigener. I disse tilfellene har personen antistoffer mot antigenet som deres røde blodlegemer ikke har, selv om de aldri har vært i kontakt med en annen persons røde blodlegemer. Dette er kjent som naturlige antistoffer.

Antigener og antistoffer relatert til blodgruppe

Blodgrupper bestemmes i tilfelle av ABO-systemet av tilstedeværelsen av spesifikke antigener (A eller B) på den røde blodlegemembran og, i motsetning, antistoffer mot det fraværende antigenet på erytrocyttmembranen.

Dermed uttrykker en person med blodgruppe A antigen A på overflaten av sine røde blodlegemer, mens det er anti-B-antistoffer i serumet.

Tvert imot, hos B-pasienter finnes B-antigenet mens antistoffene er anti-A.

Imidlertid har pasienter med AB-blod både A- og B.-antigener. Derfor er det ingen antistoffer, siden det ville ødelegge personens røde blodlegemer.

Helt motsatt forekommer i gruppe O, der erytrocyttmembranen ikke presenterer noen av de to antigenene (verken A eller B), mens det i serumet er anti-A og anti-B antistoffer.

ABO-gruppens uforenlighet

Fra det ovennevnte kan kompatibiliteten til ABO-blodgrupper lett utledes, siden å kjenne til antigenet til erytrocyttmembranen automatisk kjenner antistoffene i serumet. Så det:

- Blod A er forenlig med gruppe A og gruppe O.

- Blodgruppe B er kompatibel med blod B og O.

- Personer med gruppe O kan bare få O-blod (siden de har anti-A- og anti-B-antistoffer), selv om blodet deres blir mottatt av alle andre grupper uten problemer, siden det mangler antigener.

- Endelig. de med blodgruppe AB kan motta blod fra alle andre grupper (A, B, O og selvfølgelig AB), siden de ikke har antistoffer mot noen av antigenene. Imidlertid kan bare personer i gruppe AB få AB-blod, da alle andre grupper har antistoffer som vil ødelegge disse røde blodlegemene.

Mindre antigener

Som med ABO-grupper, kan en serie proteiner finnes på overflaten av erytrocytter som fungerer som antigener på samme måte som ABO-gruppeantigener.

Imidlertid er disse antigenene ikke til stede i alle individer. Kombinasjonen deres er heterogen, og penetransen (proteinuttryksnivået) er variabel, derfor er en klassifisering i grupper som den som eksisterer for ABO og Rh umulig. Det er her det henter navnet fra "mindre antigener", også kjent som "antigener med lav forekomst."

Selv om de ikke er hyppige, kan det være naturlige antistoffer mot mindre antigener. Blant dem de vanligste er Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb og Kidd. Alle av dem er ansvarlige for veldig alvorlige hemolytiske og post-transfusjonsreaksjoner.

I tillegg kan det være tilfelle av sensibilisering mot mindre antigener ved tidligere kontakt, enten med nevnte antigene proteiner på grunn av tidligere transfusjoner eller på grunn av kryssimmunitet.

Kryss immunitet

Det sies at det er kryssimmunitet når to antigener fra to forskjellige kilder (for eksempel en rød blodcelle og en bakterie) er veldig like, til det punktet at antistoffene mot det ene av disse antigene proteiner også reagerer med det andre fordi de er nesten identiske .

For å forstå dette bedre, ta det forrige hypotetiske eksempelet (antigener fra en rød blodcelle og en bakterie). I ingen av tilfellene er det naturlige antistoffer, men hvis en person blir utsatt for bakteriene, vil de generere antistoffer mot den.

Slike antistoffer vil senere reagere mot en rød blodcelle hvis antigenene ligner veldig på bakteriene som induserte antistoffene.

Hvis dette skjer, kan ikke de røde blodcellene med det bestemte antigene proteinet gis til personen som har antistoffene, da det ville være avvisning. Her ligger viktigheten av kryssreaksjoner.

Hva er crossmatching for?

Siden det er umulig å gruppere blod fra forskjellige individer basert på de mindre antigenene, er den eneste måten å vite om det er antistoffer mot de mindre antigenene fra de røde blodlegemene til en annen person i blodet til en person, gjennom kryssing. .

I de tilfeller der antistoffer er til stede, utløses en hemolyse- eller agglutineringsreaksjon, og det er derfor det konkluderes med at reaksjonen var positiv; det vil si at det er antistoffer mot mindre antigener (selv om det ikke er kjent nøyaktig hvilken). Ellers er testen negativ.

Basis

Kryssmatch er basert på antigen-antistoffreaksjonen. Derfor er det hos dem mulig å oppdage om det er antistoffer i serumet til en mottaker mot antigenene fra donorens røde blodlegemer (eller omvendt), noe som induserer en antigen-antistoffreaksjon.

Hvis det ikke er antistoffer, oppstår ingen reaksjon, og testen rapporteres negativ. Tvert imot, hvis reaksjonen er positiv (det er hemolyse eller agglutinering under testen), kan det konkluderes med at antistoffene er til stede.

I denne forstand er det viktig å merke seg at det kan være antistoffer mot røde blodlegemer i både giverens og mottakers serum. Dette er grunnen til at det er to typer kryssreaksjoner.

Typer kryssreaksjoner

Antistoffer mot donor erytrocytter kan eksistere i pasientens serum; men det motsatte kan også forekomme, det vil si antistoffer i giverens serum mot pasientens røde blodlegemer.

Det er grunnen til at det er to typer kryssmatch:

- Stort kryssmatch.

- Mindre kryssmatch.

Begge typer utføres rutinemessig i blodbanken før transfusjon av blodprodukter, siden hvis noen av testene er positive, er det en høy risiko for transfusjonsreaksjoner som kan sette pasientens levetid i fare.

Major korsmatch

Denne testen vurderer om mottakers serum inneholder antistoffer mot giverens røde blodlegemer.

Hvis dette skjer, kan ikke blodproduktene administreres, da en stor mengde antistoffer som er til stede i pasientens plasma vil ødelegge donorens røde blodlegemer veldig raskt, og skape katastrofale reaksjoner i mottakerens kropp i prosessen. Disse reaksjonene er så alvorlige at de kan være livstruende.

Mindre kryss

I dette tilfellet blir det bestemt om det er antistoffer mot mottakerens røde blodceller i giverens serum.

I så fall vil antistoffene begynne å ødelegge mottakerens erytrocytter. Gitt at mengden antistoffer er begrenset, er reaksjonen imidlertid mindre intens; selv om det fremdeles er farlig.

faser

Både hoved og mindre kryssmatch er delt inn i tre faser:

- Saltvann.

- Termisk eller inkubasjon.

- Coombs.

I den første fasen blandes de røde blodlegemene og serumet i saltløsning. Deretter tilsettes albumin, og prøven inkuberes ved 37C i 30 minutter for endelig å fortsette med coombs-fasen.

Teknikk

Kryssmatchteknikken er relativt grei, da den innebærer å legge røde blodceller fra donorer til pasientens serum (hovedkorsmatch) samt mottakende erytrocytter til donorserum (mindre kryssmatch).

For å indusere antigen-antistoffreaksjonen på relativt kort tid, må en serie standardiserte trinn følges. Disse trinnene er oppsummert på en forenklet måte nedenfor.

Det er viktig å merke seg at den neste delen beskriver hovedkompatibilitetstesten, selv om trinnene er de samme for den mindre kompatibilitetstesten, men utveksler opprinnelsen til røde blodlegemer og serum.

Saltfase

- Legg til et prøverør 2 dråper serum fra mottakeren (fra giveren hvis det er mindre kryssmatch).

- Ta en prøve med røde blodlegemer fra giveren (fra mottakeren hvis det er mindre kryssmatch).

- Vask og sentrifuger de røde blodlegemene.

- Resuspend i en løsning mellom 3% og 5%.

- Plasser en dråpe av denne løsningen i røret som inneholder mottakerens serum.

- Bland forsiktig.

- Sentrifuge.

- Les resultatet i displaylampe.

Termisk fase

- Tilsett 2 dråper 22% albumin til røret hvor saltfasen var fullført.

- Inkuber ved 37 ºC i 30 minutter.

- Sentrifuge i 15 sekunder.

- Les resultatet i displaylampe.

Coombs-fase

- Ta cellene fra røret og vask dem med saltoppløsning.

- Fjern supernatanten.

- Tilsett to dråper Coombs-reagens.