NEPHELOMETRY: HVA DEN BESTÅR AV OG APPLIKASJONER - KJEMI - 2026

Den nefelometri innebærer måling av strålingen som forårsakes av partikler (i oppløsning eller suspensjon), og å måle effekten til det spredte stråling ved en vinkel til retningen av den innfallende stråling.

Når en suspendert partikkel blir truffet av en lysstråle, er det en del av lyset som reflekteres, et annet parti absorberes, et annet avbøyes, og resten overføres. Dette er grunnen til at når lyset treffer et gjennomsiktig medium der det er en suspensjon av faste partikler, virker suspensjonen uklar.

Hva er nefelometri?

Spredning av stråling av partikler i oppløsning

I det øyeblikket en lysstråle treffer partiklene til et suspendert stoff, endrer strålens forplantningsretning retning. Denne effekten avhenger av følgende:

1.Dimensjoner av partikkelen (størrelse og form).

2. Kjennetegn på suspensjonen (konsentrasjon).

3. Bølgelengde og intensitet av lys.

4. Tilfeldig lysavstand.

5. Deteksjonsvinkel.

6. Brytningsindeks for mediet.

nefelometret

Nephelometer er et instrument som brukes til å måle suspenderte partikler i en væskeprøve eller i en gass. Således oppdager en fotocelle plassert i en 90 ° vinkel mot en lyskilde stråling fra partikler som er tilstede i suspensjonen.

På samme måte avhenger lyset som reflekteres av partiklene mot fotocellen av tettheten til partiklene. Diagram 1 presenterer de grunnleggende komponentene som utgjør et nefelometer:

Figur 1. Grunnleggende komponenter i et nefelometer.

TIL.

I nefelometri er det av vital betydning å ha en strålingskilde med høyt lysutbytte. Det finnes forskjellige typer, alt fra xenonlamper og kvikksølvdamplamper, wolfram halogenlamper, laserstråling, blant andre.

B.

Dette systemet er plassert mellom strålekilden og kyvetten, slik at på denne måten unngås stråling med forskjellige bølgelengder sammenlignet med ønsket stråling på kyvetten.

Ellers vil fluorescensreaksjoner eller varmeeffekter i løsningen forårsake måleavvik.

C.

Det er en generelt prismatisk eller sylindrisk beholder, og den kan ha forskjellige størrelser. I dette er løsningen man studerer.

D.

Detektoren er lokalisert i en spesifikk avstand (generelt veldig nær kyvetten) og er ansvarlig for å oppdage strålingen spredt av partiklene i suspensjonen.

OG.

Generelt er det en elektronisk maskin som mottar, konverterer og behandler data, som i dette tilfellet er målingene hentet fra undersøkelsen som er utført.

avvik

Hver måling er gjenstand for en prosentandel av feil, som hovedsakelig er gitt av:

Forurensede kyvetter: i kyvettene reduserer ethvert middel utenfor løsningen som studeres, enten det er inne i eller utenfor kyvetten, strålingslyset på vei til detektoren (mangelfulle kyvetter, støv som fester seg til kuvettens vegger).

Interferenser : tilstedeværelsen av en mikrobiell forurensning eller uklarhet sprer den strålende energien, noe som øker intensiteten til spredningen.

Fluorescerende forbindelser : dette er disse forbindelsene som, når de eksiteres av tilfeldig stråling, forårsaker feilaktige og høye spredningstetthetsavlesninger.

Reagenslagring : Utilstrekkelig systemtemperatur kan forårsake ugunstige studieforhold og kan føre til tilstedeværelse av overskyede eller utfelte reagenser.

Svingninger i elektrisk kraft : for å forhindre at innfallende stråling er en kilde til feil, anbefales spenningsstabilisatorer for jevn stråling.

Metrologiske egenskaper

Siden strålingskraften til detektert stråling er direkte proporsjonal med massekonsentrasjonen av partiklene, har nefelometriske studier i teorien en høyere metrologisk følsomhet enn andre lignende metoder (som turbidimetri).

Videre krever denne teknikken fortynnede løsninger. Dette gjør det mulig å minimere både absorpsjons- og refleksjonsfenomener.

applikasjoner

Nephelometric studier inntar en veldig viktig posisjon i kliniske laboratorier. Bruksområder spenner fra bestemmelse av immunoglobuliner og akutte fase proteiner, komplement og koagulering.

Immunkompleks deteksjon

Når en biologisk prøve inneholder et antigen av interesse, blandes det (i en bufferløsning) med et antistoff for å danne et immunkompleks.

Nephelometry måler lysmengden som er spredt av antigen-antistoffreaksjonen (Ag-Ac), og på denne måten oppdages immunkomplekser.

Denne studien kan utføres ved to metoder:

Endepunkt nefelometri:

Denne teknikken kan brukes til sluttpunktanalyse, der antistoffet fra den undersøkte biologiske prøven inkuberes i 24 timer.

Ag-Ac-komplekset måles ved hjelp av et nefelometer, og mengden spredt lys sammenlignes med den samme målingen som ble utført før komplekset ble dannet.

Kinetisk nefelometri

I denne metoden overvåkes frekvensen av kompleks dannelse kontinuerlig. Reaksjonshastigheten avhenger av konsentrasjonen av antigenet i prøven. Her blir målingene tatt som en funksjon av tiden, så den første målingen blir tatt på tiden "null" (t = 0).

Kinetisk nefelometri er den mest brukte teknikken, siden studien kan gjennomføres på 1 time, sammenlignet med den lange tidsperioden for sluttpunktmetoden. Dispersjonsforholdet måles rett etter tilsetning av reagenset.

Derfor, så lenge reagenset er konstant, anses mengden av antigen som er til stede direkte proporsjonal med endringshastigheten.

Andre apper

Nephelometry brukes vanligvis i vannkjemisk kvalitetsanalyse, for å bestemme klarhet og for å kontrollere behandlingsprosessene.

Det brukes også til å måle luftforurensning, der konsentrasjonen av partiklene bestemmes ut fra spredningen de produserer i et innfallende lys.

referanser

1. Britannica, E. (nd). Nephelometry og turbidimetry. Gjenopprettet fra britannica.com
2. Al-Saleh, M. (nd). Turbidimetry & Nephelometry. Hentet fra pdfs.semanticscholar.org
3. Bangs Laboratories, Inc. (nd). Gjenopprettet fra technochemical.com
4. Morais, IV (2006). Turbidimetrisk og nefelometrisk strømningsanalyse. Mottatt fra repository.ucp.p
5. Sasson, S. (2014). Prinsipper for nefelometri og turbidimetri. Gjenopprettet fra notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Stanley, J. (2002). Essentials of Immunology & Serology. Albany, NY: Thompson Learning. Mottatt fra books.google.co.ve
7. Wikipedia. (SF). Nephelometry (medisin). Gjenopprettet fra en.wikipedia.org