HVA ER ENKEL FARGING? ENESTÅENDE FUNKSJONER - BIOLOGI - 2025

Den eneste farging er et fargeprosedyre rask og enkel i hvilken et enkelt fargestoff blir brukt, slik at det kalles enkel. Det brukes hovedsakelig for å bestemme morfologien og organiseringen av cellene som er til stede i en prøve.

Celler er naturlig fargeløse, så det er nødvendig å synliggjøre dem på en eller annen måte når de vises under mikroskopet.

Menneskelige kinnceller farget av enkel metylenblå farging.

Det er viktig å merke seg at fargestoffene som brukes ved enkel farging må være basale med en positiv ladning (kationisk), slik at de spontant kan binde seg til celleveggen og cytoplasma.

Disse cellulære strukturer er negativt ladet. Dette er grunnen til at det positivt ladede fargestoffet tiltrekkes av celler og binder seg spontant til dem. Dermed blir alle celler som er tilstede i en prøve farget raskt.

Fargestoffer brukt i enkel farging

Det er flere grunnleggende flekker som kan brukes i mikrobiologilaboratoriet. De mest brukte er:

- Metylenblått.

- Krystallfiolett.

- Malakittgrønn.

- Grunnleggende fuchsin.

Alle disse fargestoffene fungerer godt i bakterier fordi de har positivt ladede (kationiske) fargelioner (kromoforer).

Fargetidene for de fleste av disse flekkene er relativt korte. De varierer vanligvis fra 30 sekunder til 2 minutter, avhengig av fargestoffets affinitet.

Det er viktig å huske på at før farging av en prøve ved enkel farging, må den forlenges og festes til glassgliden (lysbildet); den utvidede og faste prøven kalles utstrykning.

De 6 trinnene til enkel farging

Trinn 1

Plasser lysbildet på et fargestativ og påfør ønsket flekk. La tilsvarende tid handle.

Vanligvis tar enkel farging noen sekunder til et par minutter, avhengig av hvilken flekk som er brukt.

observasjon

I dette trinnet er det viktig å ikke overskride den anbefalte tiden for det anvendte fargestoffet, siden det kan dannes krystaller på arket, og produsere det som kalles "artefakter" som forvrenger morfologien til cellene.

Steg 2

Vask smøret grundig fra destillasjonen med destillert vann fra en flaske, eller også langsomt rennende kranvann, til avrenningen blir klar. Dette tar vanligvis 5-10 sekunder.

observasjon

Ikke bruk vannstrømmen direkte på smøringen, for å unngå at kraften til den samme skader prøven.

Hvis du ikke har destillert vann, kan du bruke tappevann uten problemer, da det ikke vil påvirke resultatet av flekker.

Trinn 3

Fjern lysbildet med absorberende papirhåndklær i en retning og uten å gni. Forsikre deg om at undersiden av lysbildet er rent.

Trinn 4

Observer den flekkete flekken under mikroskopet. Begynn med de mest fjerne mål for å lokalisere området du vil observere mer detaljert. Endre målsetningen for å komme nærmere og nærmere utvalget.

observasjon

For bruk av objektivet med en større forstørrelse (normalt 100X), bør du bruke nedsenkingolje, da dette hjelper lyset til å trenge bedre inn og bildet virker skarpere. Det er ikke nødvendig å bruke dekkglass.

Trinn 5

Til slutt, kast alle prøvene i en passende beholder som er korrekt merket "biohazard".

referanser

1. (2001). Mikrobiologiske Programmer: Laboratory Manual i General Microbiology (8 ^th ed.). McGraw-Hill-selskapene.
2. Harisha, S. (2006). En introduksjon til praktisk bioteknologi (1. ^st ). Brannmur Media.
3. Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Foreløpig farging av bakterier: Enkle flekker. Aktuelle protokoller i mikrobiologi, (SUPPL. 15), 1–5.
4. Pommerville, J. (2013). Alcamos Fundamentals of Microbiology Laboratory (10. ^trinn ). Jones & Bartlett Learning.
5. Prescott, H. (2002). Laboratorieøvelser i mikrobiologi (5. ^trinn ). McGraw-Hill-selskapene.
6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Prinsipper for mikrobiologi (1. ^st ). Tata McGraw-Hill utdanning.